Question

日本下村修、美國(guó)沙爾菲和美籍華人錢(qián)永健因在研究綠色熒光蛋白(GFP)等方面的突出貢獻(xiàn)，獲得2008年度諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。下圖為我國(guó)首例綠色熒光蛋白(GFP)轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過(guò)程示意圖。據(jù)圖回答：

(1)圖中通過(guò)過(guò)程①、②形成重組質(zhì)粒，需要限制性核酸內(nèi)切酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。限制性核酸內(nèi)切酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G^↓GATCC—，請(qǐng)畫(huà)出質(zhì)粒被限制酶I切割后所形成的黏性末端：____________________________________­­______________。
(2)過(guò)程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時(shí)，采用最多也最有效的方法是________________________________。
(3)如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達(dá)的基因一起構(gòu)建到載體上，GFP基因可以作為基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因，其作用是______________________________。
(4)目前科學(xué)家們通過(guò)蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白、黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過(guò)程的正確順序是(用數(shù)字表示)________________________。
①推測(cè)藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸
②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)序列
③藍(lán)色熒光蛋白基因的修飾(合成)
④表達(dá)出藍(lán)色熒光蛋白
（5）若要在體外擴(kuò)增綠色熒光蛋白基因可采用PCR技術(shù)。標(biāo)準(zhǔn)的PCR過(guò)程分為三個(gè)步驟，第一步是“變性”,這一步驟如果發(fā)生在細(xì)胞內(nèi)，是在                    的作用下完成的；第二步是退火；第三步是“延伸”，需要用到                      酶。
(6)以上培育過(guò)程中應(yīng)用到的生物技術(shù)有_________________________________________等。(至少答出三項(xiàng))   

Answer 1

（1）
 
(2)顯微注射技術(shù)　(3)為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因　(4)②①③④　
(5)解旋酶   Taq(耐高溫的DNA聚合酶)　
(6)轉(zhuǎn)基因技術(shù)、核移植技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)(至少答出三項(xiàng))

解析