Question

某研究小組進(jìn)行藥物試驗(yàn)時(shí)，以動(dòng)物肝細(xì)胞為材料，測(cè)定藥物對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性。供培養(yǎng)的細(xì)胞有甲、乙兩種，甲細(xì)胞為肝腫瘤細(xì)胞，乙細(xì)胞為正常肝細(xì)胞。請(qǐng)回答下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問(wèn)題：

（1）將數(shù)量相等的甲細(xì)胞和乙細(xì)胞分別置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，培養(yǎng)液及其它培養(yǎng)條件均相同。一段時(shí)間后，觀察到甲細(xì)胞數(shù)量比乙細(xì)胞數(shù)量____，因?yàn)榧拙哂衉___特點(diǎn)。

（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，常在合成培養(yǎng)基中加入適量血清，其原因是____。細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO₂的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO₂的作用是____。

（3）在兩種細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中，當(dāng)乙細(xì)胞鋪滿瓶壁時(shí)，其生長(zhǎng)____。藥物試驗(yàn)需要大量細(xì)胞，兩種細(xì)胞頻繁傳代，甲細(xì)胞比乙細(xì)胞可以傳代的次數(shù)更____。若用動(dòng)物的肝臟組織塊制備肝細(xì)胞懸液，需用____消化處理。

（4）為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的____。如細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中要保存細(xì)胞，則通常在____條件下，因?yàn)樵谶@種條件下，細(xì)胞中____________的活性降低，細(xì)胞____________的速率降低。

（5）已知癌基因X過(guò)量表達(dá)與肝腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)，要試驗(yàn)一種抗腫瘤藥物Y對(duì)甲細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，可將甲細(xì)胞分為A、B兩組，A組細(xì)胞培養(yǎng)液中加入____，B組細(xì)胞培養(yǎng)液中加入無(wú)菌生理鹽水，經(jīng)培養(yǎng)后，從A、B兩組收集等量細(xì)胞，通過(guò)分別檢測(cè)X基因在A、B兩組細(xì)胞中的____或____合成水平的差異，確定Y的藥效。

Answer 1

（1）多 快速增殖
（2）血清可以補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)  維持培養(yǎng)液pH
（3）停止　多 胰蛋白酶
（4）抗生素   冷凍(或超低溫、液氮) 　酶 　　新陳代謝
（5）Y  mRNA  蛋白質(zhì)
肝腫瘤細(xì)胞壁正常肝細(xì)胞的分裂能力強(qiáng)，細(xì)胞周期短，在其他條件相同時(shí)，相同時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生的子代細(xì)胞多，在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中，需要加入適宜血清可以補(bǔ)充培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)，而5%CO₂的作用可以起到緩沖物質(zhì)作用，維持培養(yǎng)液pH；正常動(dòng)物細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)是存在接觸抑制現(xiàn)象，當(dāng)鋪滿瓶壁時(shí)就停止生長(zhǎng)，腫瘤細(xì)胞則沒(méi)有接觸抑制現(xiàn)象，而且可以更多次的進(jìn)行傳代；培養(yǎng)瓶中加入抗生素可以抑制細(xì)菌的活動(dòng)；（5）中要設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)是要實(shí)驗(yàn)抗腫瘤藥物Y對(duì)甲細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，所以A、B兩組肯定是一組加入Y，一組不加；而腫瘤細(xì)胞與一般細(xì)胞之間的在合成水平上的差異在于腫瘤細(xì)胞會(huì)合成較多的蛋白質(zhì)，同時(shí)也會(huì)形成較多的mRNA。