Question

【題目】為了更快的提高綿羊生產(chǎn)效率和羊肉品質(zhì)，國內(nèi)某工廠引進德國美利奴羊，并嘗試以美利奴羊為研究對象設(shè)計實驗探究亞麻酸在胚胎工程中的作用。請分析回答：

①卵母細胞的采集和培養(yǎng)：選用美利奴羊純種母羊作為供體，注射促卵泡生成素（FSH）以及促黃體生成素（LH），然后收集并處理卵母細胞，隨機分成5組，分別置于不同濃度亞麻酸的培養(yǎng)液中，在37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)22～24h。在顯微鏡下觀察卵母細胞，判斷是否成熟，統(tǒng)計結(jié)果如表1。

②精子的采集：選用該種羊場飼養(yǎng)的東北半細毛羊公羊獲得精子，并利用適宜濃度的肝素進行處理。

③體外受精：在獲能溶液中完成受精過程后，用顯微鏡觀察。

④早期胚胎培養(yǎng)：將受精卵移入胚胎培養(yǎng)液中培養(yǎng)44～48h后檢查分裂情況，每隔48h更換一次培養(yǎng)液，第5～9天觀察囊胚發(fā)育情況，統(tǒng)計結(jié)果如表2。

表1亞麻酸對綿羊卵母細胞體外成熟的影響

ALA濃度/umol●L-1	卵時細胞數(shù)	核成熟卵子數(shù)
0	229	137
10	201	133
50	227	166
100	215	188
200	215	135

表2亞麻酸對綿羊 早期胚胎發(fā)育的影響

ALA濃度/umol●L-1.	培養(yǎng)卵數(shù)	囊胚數(shù)
0	309	75
10	325.	82
50	292.	97
100	310	127
200	231	68

（1）步驟①注射FSH和LH的目的是____________，步驟②使用肝素的目的是__________。

（2）步驟③中，判斷是否受精的依據(jù)是________，如需對胚胎進行性別鑒定，可取囊胚期的__________。

（3）根據(jù)實驗數(shù)據(jù)分析，亞麻酸溶液為200μmol·L-1 時，對綿羊卵母細胞體外成熟和囊胚發(fā)育起__________作用。本實驗結(jié)果表明，__________μmol·L-1 的亞麻酸對綿羊卵母細胞體外成熟和囊胚發(fā)育都較有利，其判斷依據(jù)是__________。

Answer 1

【答案】誘導(dǎo)羊進行超數(shù)排卵 使精子獲能 在卵細胞膜和透明帶的間隙可否觀察到兩個極體 滋養(yǎng)層細胞 促進 100 核成熟卵子數(shù)占卵母細胞的比例最高，囊胚數(shù)占培養(yǎng)卵數(shù)的比例最高

【解析】

1、體外受精主要包括：卵母細胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、受精。（1）卵母細胞的采集和培養(yǎng)①主要方法是：用促性腺激素處理，使其超數(shù)排卵，然后，從輸卵管中沖取卵子。②第二種方法：從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細胞或直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細胞。（2）精子的采集和獲能①收集精子的方法：假陰道法、手握法和電刺激法。②對精子進行獲能處理：包括培養(yǎng)法和化學(xué)誘導(dǎo)法。（3）受精：在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫�溶液中完成受精過程。
2、分析表格：亞麻酸溶液為0μmol·L-1的一組為對照組，其他為實驗組。與對照組相比“核成熟卵子數(shù)占卵母細胞的比例”和“囊胚數(shù)占培養(yǎng)卵數(shù)的比例”即可判斷該濃度的作用是促進還是抑制。

（1）根據(jù)題干信息“注射促卵泡生成素（FSH）以及促黃體生成素（LH），然后收集并處理卵母細胞”可知，步驟①注射FSH和LH的目的是誘導(dǎo)羊進行超數(shù)排卵；精子采集后需要進行獲能處理，因此步驟②使用肝素的目的是使精子獲能。
（2）判斷是否受精的依據(jù)是在卵細胞膜和透明帶的間隙可否觀察到兩個極體；對胚胎進行性別鑒定時，可取囊胚期的滋養(yǎng)層細胞進行DNA分析來鑒定性別。
（3）根據(jù)實驗數(shù)據(jù)分析，亞麻酸溶液為200μmol·L-1時，核成熟卵子數(shù)占卵母細胞的比例以及囊胚數(shù)占培養(yǎng)卵數(shù)的比例都比對照組高，這說明該濃度的亞麻酸溶液對綿羊卵母細胞體外成熟和胚發(fā)育起促進作用。本實驗結(jié)果表明，亞麻酸溶液為100μmol·L-1時，核成熟卵子數(shù)占卵母細胞的比例最高，囊胚數(shù)占培養(yǎng)卵數(shù)的比例最高，說明該濃度的亞麻酸溶液對綿羊卵母細胞體外成熟和囊胚發(fā)育都較有利。