Question

【題目】已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖。將這兩種細(xì)胞在培養(yǎng)皿中混合，加促融劑促進(jìn)細(xì)胞融合，獲得雜種細(xì)胞，并生產(chǎn)單克隆抗體。請回答下列有關(guān)問題：

（1）生產(chǎn)單克隆抗體時，一般不直接利用B淋巴細(xì)胞，主要原因是____________________________________________________________________。

（2）①過程中，常用的與植物細(xì)胞融合相同的誘導(dǎo)劑是__________。

（3）②過程為________培養(yǎng)，培養(yǎng)液中還需通入氣體物質(zhì)，其中通入CO2的目的是__________________________________________________________________。

（4）④表示雜交瘤細(xì)胞的擴(kuò)大培養(yǎng)，其既可在體外培養(yǎng)，也可注射到小鼠________內(nèi)培養(yǎng)，體內(nèi)培養(yǎng)與體外培養(yǎng)相比，其優(yōu)點是____________________。

（5）為了從培養(yǎng)液中分離出雜交瘤細(xì)胞，需要③過程向培養(yǎng)液中加入_____________，理由是雜交瘤細(xì)胞可利用__________________途徑合成DNA，從而才能在該培養(yǎng)液中增殖。

Answer 1

【答案】B淋巴細(xì)胞不能無限增殖 聚乙二醇 細(xì)胞 維持培養(yǎng)液的pH 腹腔 無需再提供營養(yǎng)物質(zhì)以及無菌環(huán)境，操作簡便 氨基嘌呤 淋巴細(xì)胞中的S

【解析】

1、人淋巴細(xì)胞、鼠骨髓瘤細(xì)胞發(fā)生融合后，培養(yǎng)皿中有3中融合細(xì)胞（人淋巴細(xì)胞與人淋巴細(xì)胞融合細(xì)胞、鼠骨髓瘤細(xì)胞與鼠骨髓瘤細(xì)胞融合細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞）和人淋巴細(xì)胞、鼠骨髓瘤細(xì)胞。

2、鼠骨髓瘤細(xì)胞、鼠骨髓瘤細(xì)胞與鼠骨髓瘤細(xì)胞融合細(xì)胞中只有D途徑，雜交瘤細(xì)胞中有D和S兩條途徑。

（1）生產(chǎn)單克隆抗體時，一般不直接利用B淋巴細(xì)胞，主要原因是B淋巴細(xì)胞屬于高度分化的細(xì)胞，不能無限增殖。

（2）植物細(xì)胞常采用電刺激、聚乙二醇等手段進(jìn)行融合，而動物細(xì)胞采用電刺激、聚乙二醇、仙臺病毒等手段進(jìn)行融合。因此，①過程中常用的與植物細(xì)胞融合相同的誘導(dǎo)劑是聚乙二醇。

（3）②過程為細(xì)胞培養(yǎng)，培養(yǎng)液中還需通入氣體物質(zhì)，其中通入氧氣維持細(xì)胞呼吸，通入CO2維持培養(yǎng)液的pH。

（4）雜交瘤細(xì)胞既可在體外培養(yǎng)，也可注射到小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)。體內(nèi)培養(yǎng)與體外培養(yǎng)相比，其優(yōu)點是無需再提供營養(yǎng)物質(zhì)以及無菌環(huán)境，操作簡便。

（5）人淋巴細(xì)胞、鼠骨髓瘤細(xì)胞在培養(yǎng)皿中混合，加聚乙二醇促進(jìn)細(xì)胞融合，培養(yǎng)液中的細(xì)胞有以下5種：人淋巴細(xì)胞、鼠骨髓瘤細(xì)胞、人淋巴細(xì)胞與人淋巴細(xì)胞融合細(xì)胞、鼠骨髓瘤細(xì)胞與鼠骨髓瘤細(xì)胞融合細(xì)胞以及雜交瘤細(xì)胞。其中，人淋巴細(xì)胞、人淋巴細(xì)胞與人淋巴細(xì)胞融合細(xì)胞不能無限繁殖，不久會衰老、死亡。向培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，氨基嘌呤可阻斷D途徑，只有D途徑的鼠骨髓瘤細(xì)胞、鼠骨髓瘤細(xì)胞與鼠骨髓瘤細(xì)胞融合細(xì)胞無法增殖，而雜交瘤細(xì)胞可利用S途徑合成DNA，繼續(xù)繁殖，從而分離出雜交瘤細(xì)胞。