Question

【題目】為了解決番木瓜環(huán)斑病毒引起番木瓜產(chǎn)量下降問(wèn)題，我國(guó)研發(fā)了抗番木瓜環(huán)斑病毒轉(zhuǎn)基因番木瓜品種。下圖表示該抗番木瓜環(huán)斑病毒轉(zhuǎn)基因番木瓜的主要培育流程，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）番木瓜環(huán)斑病毒是一種變異性很強(qiáng)的RNA病毒。要想獲得番木瓜環(huán)斑病毒復(fù)制酶基因，可先將番木瓜環(huán)斑病毒的RNA經(jīng)過(guò)____________形成cDNA，此過(guò)程遵循______________原則。

（2）在過(guò)程①的操作中，需要將番木瓜環(huán)斑病毒復(fù)制酶基因插入Ti質(zhì)粒的____________，其原因是_____________________________________________________________________。在過(guò)程②的操作中，將重組Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌中培養(yǎng)一段時(shí)間的目的是________________。

（3）給番木瓜細(xì)胞轉(zhuǎn)入外來(lái)基因，成功的概率是很低的，可采用___________________________技術(shù)來(lái)檢測(cè)愈傷組織中是否導(dǎo)入了外來(lái)基因。圖中過(guò)程④和⑤中芽和根的分化與________________（填激素名稱(chēng)）有關(guān)。

Answer 1

【答案】逆轉(zhuǎn)錄 堿基互補(bǔ)配對(duì) T-DNA T-DNA可攜帶目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上 大量復(fù)制目的基因 DNA分子雜交 生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素

【解析】

（1）考查基因工程育種的過(guò)程。圖示過(guò)程中①為獲得重組質(zhì)粒的過(guò)程，該過(guò)程中需要限制酶和DNA連接酶、②為導(dǎo)入受體細(xì)胞的過(guò)程、③為脫分化、④為再分化生出芽的過(guò)程、⑤為再分化生出根的過(guò)程。④與⑤的分化方向與培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例有關(guān)。
（2）在分子水平上的檢測(cè)目的基因有三種方法：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。

（1）因?yàn)榉�木瓜環(huán)斑病毒是一種RNA病毒。要想獲得番木瓜環(huán)斑病毒復(fù)制酶基因，需先將番木瓜環(huán)斑病毒的RNA經(jīng)過(guò)逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程形成cDNA，此過(guò)程遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則。
（2）在過(guò)程①的操作中，因?yàn)?/span>Ti質(zhì)粒的T-DNA是可轉(zhuǎn)移的DNA，所以需要將番木瓜環(huán)斑病毒復(fù)制酶基因插入其中，進(jìn)而T-DNA可攜帶目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上。在過(guò)程②的操作中，將重組Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌培養(yǎng)一段時(shí)間的目的是為了獲得大量的目的基因，以便為后續(xù)的工作提供基礎(chǔ)。
（3）據(jù)分析知：本題中檢測(cè)目的基因是否成功導(dǎo)入采用DNA分子雜交技術(shù)來(lái)檢測(cè)。過(guò)程④和⑤中芽和根的分化與生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素有關(guān)。