Question

（8分）（生物一現(xiàn)代生物科技專題）

人類在預(yù)防與診療傳染性疾病過程中，經(jīng)常使用疫苗和抗體。已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原，且疾苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一如下圖：

請回答：
（1）過程①代表的是        。
（2）過程②構(gòu)建A基因表過載體時，必須使用          和         兩種工具酶。
（3）過程③采用的實驗技術(shù)是       ，獲得的X是           。
（4）對健康人進行該傳染病免疫預(yù)防時，可選用圖中基因工程生產(chǎn)的         所制備的疫苗。對該傳染病疑似患者確診時，可以疑似患者體內(nèi)分離病毒，與已知病毒進行      比較；或用圖中的          進行特異性結(jié)合檢測。

Answer 1

（1）逆轉(zhuǎn)錄
（2）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶、限制性內(nèi)切酶）  DNA連接酶（兩空可以互換）
（3）細胞融合 雜交瘤細胞
（4） A蛋白 核酸（基因）序列 抗A蛋白的單克隆抗體

解析本題以圖展示了疫苗的生產(chǎn)和單克隆抗體的制備的過程，考察了中心法則、基因工程、動物細胞工程等現(xiàn)代生物科技。
（1）中心法則中，對于少數(shù)的以RNA為遺傳物質(zhì)的病毒，其遺傳信息的傳遞過程需要補充的過程有RNA的逆轉(zhuǎn)錄和RNA的復制的過程，圖中過程①正代表的是逆轉(zhuǎn)錄的過程
（2）基因工程的步驟是：目的基因的提取——構(gòu)建基因表達載體——導入受體細胞——目的基因的檢測和表達，其中構(gòu)建基因表達載體中需要限制酶來切割以獲取目的基因，同時需要相同的限制酶切割運載體以獲取與目的基因相同的黏性末端，再通過 DNA連接酶連接目的基因和運載體。
（3）過程③是將瘤細胞與B淋巴細胞融合的過程，獲得的叫雜交瘤細胞，其具備了瘤細胞的無限增殖的特性和B淋巴細胞的產(chǎn)生抗體的特性，從而制備單克隆抗體。
（4）本題考察了免疫預(yù)防的操作過程，以及欲確診疑似患者而采取的方法。本題中提示該RNA病毒表面的A蛋白為主要的抗原，故而可選用通過基因工程生產(chǎn)的A蛋白制備疫苗；確診時為判斷該病毒是否為題目中的RNA病毒，可以進行核酸序列的比對，也可以利用單克隆抗體具備特異性，利用抗A蛋白的特異性單克隆抗體通過能否特異性結(jié)合判斷病毒表面是否有A蛋白的存在進一步進行檢測是否為目的RNA病毒。