Question

【題目】如圖是利用基因工程技術生產人胰島素的操作過程示意圖，請據(jù)圖作答：

(1)能否利用人的皮膚細胞來完成①過程？________為什么？__________。

(2)過程②必需的酶是________酶，過程③在體外需要的條件是________，過程④在體外必需的酶是________酶，上圖用________(方法)來獲得目的基因。

(3)在利用A、B獲得C的過程中，必須用________________切割A和B，使它們產生________________，再加入________，才可形成C。

(4)C的組成除必須含有________、________、復制原點外，還必須有________和________。

(5)圖中的D是基因工程中的受體細胞，為了使過程⑧更易進行，可________處理D。

Answer 1

【答案】不能由于基因選擇性表達，人的皮膚細胞胰島素基因不能表達得到胰島素逆轉錄加熱熱穩(wěn)定DNA聚合(Taq)反轉錄法同一種限制酶相同的黏性末端DNA連接酶目的基因標記基因啟動子終止子Ca2＋

【解析】

考查利用反轉錄法合成目的基因及利用基因工程技術生產基因產物的的基本操作程序，旨在考查系統(tǒng)掌握基因工程技術的情況。

(1) 不能從皮膚細胞中獲得胰島素基因的mRNA,是因為基因選擇性表達，人的皮膚細胞胰島素基因不表達。

(2)過程②是逆轉錄，必需的酶是逆轉錄酶。過程③是解旋，在體外需要的條件是加熱。過程④是以DNA一條鏈為模板合成子代DNA，在體外必需的酶是熱穩(wěn)定DNA聚合(Taq)酶，上圖用反轉錄法來獲得目的基因。

(3) A、B分別是含目的基因的DNA片段和質粒， C是重組質粒，此過程中，必須用同種限制酶切割A和B，使它們產生相同的粘性末端，再加入DNA連接酶，才可形成重組質粒。

(4)重組質粒必須含有目的基因、標記基因、復制原點外，還必須有啟動子和終止子。

(5)為了使受體細胞更容易吸收重組質粒，可用處理 Ca2＋處理，使其處于感受態(tài)。