Question

35.（7分）棉鈴蟲(chóng)是一種危害棉花的害蟲(chóng)。我國(guó)科學(xué)工作者發(fā)現(xiàn)一種生活在棉鈴蟲(chóng)消化道內(nèi)的蘇云金桿菌能分泌一種毒蛋白使棉鈴蟲(chóng)致死，而這種毒蛋白對(duì)人畜無(wú)害。通過(guò)基因工程方法，科學(xué)家采用花粉管通道法將毒蛋白基因轉(zhuǎn)入棉花植株并成功表達(dá)，棉鈴蟲(chóng)吃了這種轉(zhuǎn)基因棉花的植株后就會(huì)死亡。花粉管通道法是指：利用植物花粉萌發(fā)時(shí)形成的花粉管通道將毒蛋白基因送入胚囊，進(jìn)而導(dǎo)入尚不具備細(xì)胞壁的合子或早期胚細(xì)胞，最終形成含有目的基因的種胚。此種方法的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便，省去了組培的復(fù)雜過(guò)程。

（1）利用花粉管通道法將毒蛋白基因?qū)�入棉花�?xì)胞，此過(guò)程是基因操作的基本步驟中的第三步，即                  。構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)要把目的基因整合到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，其原因是                    。

（2）基因工程的工具酶可以將目的基因切下并連接到運(yùn)載體上。限制酶可以識(shí)別特定的DNA序列，并切斷         鍵。下列所示的黏性末端是由         種限制酶作用產(chǎn)生的。

（3）用標(biāo)記的特異性抗體可以直接檢測(cè)毒蛋白，這種檢測(cè)方法稱(chēng)為                 。

也可在宏觀性狀水平檢測(cè)該目的基因是否表達(dá)，方法是                  。已知轉(zhuǎn)基因植物中毒素蛋白只結(jié)合某些昆蟲(chóng)腸上皮細(xì)胞表面的特異受體，使細(xì)胞膜穿孔，腸細(xì)胞裂解，昆蟲(chóng)死亡。而該毒素蛋白對(duì)人類(lèi)的風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較小，原因是人類(lèi)腸上皮細(xì)胞                 。

Answer 1

【答案】

35.（7分）

（1）將重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞  Ti質(zhì)粒能將目的基因整合到棉花染色體上   

（2）磷酸二酯鍵    4

（3）抗原-抗體雜交     讓害蟲(chóng)吃棉花，觀察害蟲(chóng)的生存狀態(tài)      表面無(wú)特異性受體

【解析】利用花粉管通道法將毒蛋白基因?qū)�入棉花�?xì)胞，相當(dāng)于基因工程操作步驟中的第三步——“將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞”。據(jù)圖分析限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別序列為GAATT 、CAATT、GTTAA、CTTAA這4種，而酶具有專(zhuān)一性，故需4種不同的限制性核酸內(nèi)切酶。目的基因的檢測(cè)與鑒定相關(guān)方法為：通過(guò)分子雜交技術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的DNA是否插入了目的基因及目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA。