Question

【題目】轉基因抗病香蕉的培育過程如圖1所示，圖2表示PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ和ApaⅠ四種限制酶的識別序列及酶切位點。請據(jù)圖回答下列問題：

（1）圖中限制酶切割DNA時破壞的是兩個_____________之間的化學鍵。

（2）在構建圖1中的重組質粒時要保證目的基因被連接在質粒上特定的_____________和終止子之間才能保證目的基因在受體細胞中被成功________。

（3）將抗病基因從含抗病基因的DNA中切割下來，使用的限制酶是______________，同時也應該用相同的酶對質粒進行切割，這樣處理的原因是________________________________。請寫出單獨用PstⅠ切割質粒后的片段：______________________________________。

（4）轉基因抗病香蕉的培育是否發(fā)生了可遺傳變異？______________。

Answer 1

【答案】脫氧(核糖)核苷酸 啟動子 轉錄（或者填表達） PstⅠ和EcoRⅠ 用相同的酶切割質粒才能產(chǎn)生與目的基因相同的末端，便于二者進行拼接 和 是

【解析】

分析題圖：圖示為轉基因抗病香蕉的培育流程圖，首先采用基因工程技術得到含有目的基因的受體細胞（獲取目的基因、構建基因表達載體、采用農(nóng)桿菌轉化法將目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測和表達）；其次采用植物組織培養(yǎng)技術將受體細胞培育成轉基因植株。

（1）限制酶特異性識別DNA中特定的核苷酸序列，切斷兩個脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵。

（2）在構建圖1中的重組質粒時要保證目的基因被連接在質粒上特定的啟動子和終止子之間才能保證目的基因在受體細胞中被成功轉錄。

（3）含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位點，但限制酶Sma I的切割位點位于目的基因上，用該酶切割含有目的基因的外源DNA分子時會破壞目的基因，所以選限制酶Pst I和EcoRI對目的基因進行切割，這樣不會對目的基因造成破壞。故使用這兩種限制酶切割目的基因和質粒。用相同的酶切割質粒才能產(chǎn)生與目的基因相同的末端，產(chǎn)生相同的黏性末端，便于二者進行拼接。質粒會被限制酶Pst l、Sma I、EcoR I同時切割成三段，EcoR I、Pst l切割質粒形成的是黏性末端，且每種酶切割質粒后會形成兩個黏性末端，Sma I切割形成的是平末端，所以三種限制酶切割質粒會形成四個黏性末端。根據(jù)圖2顯示，可以推出單獨用PstⅠ切割質粒后的片段：和。

（4）轉基因抗病香蕉的培育原理是基因重組，發(fā)生了可遺傳變異。