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科目:高中生物 來源: 題型:
目前基因工程所用的質(zhì)粒載體主要是以天然細(xì)菌質(zhì)粒的各種元件為基礎(chǔ)重新組建的人工質(zhì)粒,pBR322質(zhì)粒是較早構(gòu)建的質(zhì)粒載體,其主要結(jié)構(gòu)如圖一所示。
(1)建構(gòu)基因表達(dá)載體時(shí),必須有 、復(fù)制原點(diǎn)、目的基因、終止子以及 。
(2)構(gòu)建人工質(zhì)粒時(shí)要有抗性基因,以便于 。
(3)pBR322分子中有單個(gè)EcoRI限制酶作用位點(diǎn),EcoRl只能識別序列—GAATTC一,并只能在G與A之間切割。若在某目的基因的兩側(cè)各有1個(gè)EcoRl的切點(diǎn),請畫出目的基因兩側(cè)被限制酶EcoRI切割后所形成的黏性末端 。
(4)pBR322分子中另有單個(gè)的BamHI限制酶作用位點(diǎn),現(xiàn)將經(jīng)BamHI處理后的質(zhì)粒與用另一種限制酶BglⅡ處理得到的目的基因,通過DNA連接酶作用恢復(fù) ,成功獲得了重組質(zhì)粒。說明 。
(5)為了檢測上述重組質(zhì)粒是否導(dǎo)入原本無ampR和tetR的大腸桿菌,將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖二的菌落;再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上,使絨布面沾上菌落,然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖三的結(jié)果(空圈表示與圖二對照無菌落的位置)。與圖三空圈相對應(yīng)的圖二中的菌落表現(xiàn)型是 。圖三結(jié)果顯示,多數(shù)大腸桿菌導(dǎo)入的是 。
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科目:高中生物 來源:2013年上海市普陀區(qū)高三高考二模生物試卷 題型:綜合題
研究人員利用基因工程技術(shù)對肺癌的治療進(jìn)行了大量研究,肺部細(xì)胞中的let-7基因表達(dá)減弱,癌基因RAS表達(dá)增強(qiáng),會引發(fā)肺癌。研究人員利用基因工程技術(shù)將let-7基因?qū)敕伟┘?xì)胞實(shí)現(xiàn)表達(dá),發(fā)現(xiàn)肺癌細(xì)胞的增殖受到抑制。該基因工程技術(shù)基本流程如圖所示,據(jù)圖回答
1.在基因工程中通常選擇細(xì)菌質(zhì)粒作為載體,原因是 ;如果某質(zhì)粒由100 0個(gè)脫氧核苷酸組成,脫氧核苷酸平均分子量為a,則該質(zhì)粒的質(zhì)量為 。
2.圖甲中在構(gòu)建重組載體時(shí),酶切目的基因和酶切質(zhì)粒時(shí),所用的限制酶可以不同,但是產(chǎn)生的粘性末端必須是 。
3.圖甲中在將酶切后的目的基因?qū)氲矫盖泻蟮馁|(zhì)粒上時(shí)需要的酶是 , 圖乙中l(wèi)et-7基因轉(zhuǎn)錄過程需要的酶是 ,這 兩種酶作用的化學(xué)鍵都是 。
4.EcoR I限制酶只能識別序列一GAATTC一,并只能在G與A之間切割。若在某目的基因的兩側(cè)各有1個(gè)EcoR I的切點(diǎn),請畫出目的基因兩側(cè)被限制酶EcoR I切割后所形成的黏性末端。
5.原代培養(yǎng)是是指直接從機(jī)體取下細(xì)胞、組織和器官后立即進(jìn)行培養(yǎng)。原代培養(yǎng)隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長和細(xì)胞不斷分裂,空間因素和營養(yǎng)因素會限制其進(jìn)一步生長。此時(shí)就需要將培養(yǎng)物分割成小的部分(組織細(xì)胞分散開),重新接種到另外的培養(yǎng)器皿內(nèi)再進(jìn)行培養(yǎng),這個(gè)過程就稱為傳代或者再培養(yǎng)。圖甲中進(jìn)行傳代培養(yǎng)操作時(shí),需要用 酶處理貼附在原代培養(yǎng)培養(yǎng)皿壁上的細(xì)胞,以利于傳代培養(yǎng)。
6.研究發(fā)現(xiàn),let-7基因能影響RAS基因的表達(dá),其影響機(jī)理如圖乙所示。從分子水平的角度分析,其作用機(jī)理是 。
7.下圖所示pBR322是目前常用的人工質(zhì)粒載體。如果將BamHI處理后的pBR322質(zhì)粒與用BgIⅡ處理得到的目的基因進(jìn)行重組,并將重組質(zhì)粒導(dǎo)入原本無ampR和tetR 的大腸桿菌進(jìn)行培養(yǎng)。為了檢測重組質(zhì)粒是否成功導(dǎo)入大腸桿菌,現(xiàn)將上述大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖二的菌落。再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上,使絨布面沾上菌落,然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖三的結(jié)果(空圈表示與圖二對照無菌落的位置)。與圖三空圈相對應(yīng)的圖二中的菌落表現(xiàn)型是___ _____ ,圖三結(jié)果顯示,多數(shù)大腸桿菌內(nèi)導(dǎo)入的是___ __。
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科目:高中生物 來源:2013屆海南省高二下學(xué)期期中考試生物試卷(解析版) 題型:綜合題
目前所用的質(zhì)粒載體主要是以天然細(xì)菌質(zhì)粒的各種元件為基礎(chǔ)重新組建的人工質(zhì)粒,pBR322質(zhì)粒是較早構(gòu)建的質(zhì)粒載體,其主要結(jié)構(gòu)如圖所示。
(1)構(gòu)建人工質(zhì)粒時(shí)要有抗性基因,以便于 。
(2)pBR322分子中有單個(gè)EcoR I限制酶作用位點(diǎn),EcoR 1只能識別序列一GAATTC一,并只能在G與A之間切割。若在某目的基因的兩側(cè)各有1個(gè)EcoR I的切點(diǎn),請畫出目的基因兩側(cè)被限制酶EcoR I切割后所形成的黏性末端。
(3)pBR322分子中另有單個(gè)的BamHI限制酶作用位點(diǎn),現(xiàn)將經(jīng)BamHI處理后的質(zhì)粒與用另一種限制酶BgIⅡ處理得到的目的基因,通過DNA連接酶作用恢復(fù)___ ___ 鍵,成功的獲得了重組質(zhì)粒。
(4)為了檢測上述重組質(zhì)粒是否導(dǎo)入原本無ampR和tetR的大腸桿菌,將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖二的菌落。再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上,使絨布面沾上菌落,然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖三的結(jié)果(空圈表示與圖二對照無菌落的位置)。與圖三空圈相對應(yīng)的圖二中的菌落表現(xiàn)型是___ _____ ,圖三結(jié)果顯示,多數(shù)大腸桿菌導(dǎo)入的是___ __。
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科目:高中生物 來源:2011-2012學(xué)年山西省高三上學(xué)期9月份月考生物試卷 題型:綜合題
(11分)目前基因工程所用的質(zhì)粒載體主要是以天然細(xì)菌質(zhì)粒的各種元件為基礎(chǔ)重新組建的人工質(zhì)粒,pBR322質(zhì)粒是較早構(gòu)建的質(zhì)粒載體,其主要結(jié)構(gòu)如圖一所示。
(1)構(gòu)建人工質(zhì)粒時(shí)要有抗性基因,以便于________。觀察上圖,如果A為質(zhì)粒,則C表示 。
(2)pBR322分子中有單個(gè)EcoRⅠ限制酶作用位點(diǎn),EcoRⅠ只能識別序列—GAATTC—,并只能在G與A之間切割。若在某目的基因的兩側(cè)各有1個(gè)EcoRⅠ的切點(diǎn),請畫出目的基因兩側(cè)被限制酶EcoRⅠ切割后所形成的黏性末端。
_______________________________________________________________________
(3)pBR322分子中另有單個(gè)的BamHⅠ限制酶作用位點(diǎn),現(xiàn)將經(jīng)BamHⅠ處理后的質(zhì)粒與用另一種限制酶BglⅡ處理得到的目的基因,通過____________作用恢復(fù)________________________鍵,成功地獲得了重組質(zhì)粒。能形成重組質(zhì)粒的原因是_______________________________________________________________________
(4) 作為受體大腸桿菌應(yīng)不含_______________________,以方便篩選已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌。將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖二的菌落。再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上,使絨布面沾上菌落,然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖三的結(jié)果(空圈表示與圖二對照無菌落的位置)。與圖三空圈相對應(yīng)的圖二中的菌落表現(xiàn)型是_______,圖三結(jié)果顯示,多數(shù)大腸桿菌導(dǎo)入的是______________。
(5)基因工程中使用的限制酶,其特點(diǎn)是_______________________,下圖四種質(zhì)粒含有E1和E2兩種限制酶的識別,Apr表示抗青霉素的抗性基因,Tcr表示抗四環(huán)素的抗性基因。
將兩端用E1切開的Tcr基因與用E1切開的質(zhì)粒X-1混合連接,連接后獲得的質(zhì)粒類型有___。(可多選)A.X-1 B.X-2 C.X-3 D.X-4
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科目:高中生物 來源:2010-2011學(xué)年山東省高三上學(xué)期第三次質(zhì)量檢測生物試卷 題型:選擇題
大腸桿菌的某蛋白質(zhì)分子有1條肽鏈組成,其相對分子質(zhì)量為a,假如組成此蛋白質(zhì)的氨基酸的相對分子質(zhì)量為b,則控制該蛋白質(zhì)合成的結(jié)構(gòu)基因最可能有堿基多少個(gè)?(不考慮終止密碼)
A.3(a-18)/b B.6(a-18)/b C.3(a-18)/(b-18) D.6(a-18)/(b-18)
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