Question

研究發(fā)現(xiàn)僅在大豆葉肉細(xì)胞中存在一種多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGP)，它能夠特異性地抑制部分致病真菌細(xì)胞內(nèi)的多聚半乳糖醛酸酶的活性，從而減弱病原菌對(duì)植株的侵害。研究人員成功地將PGP基因?qū)�入小麥體內(nèi)，以期獲得抗根腐病能力更高的小麥新品種。請(qǐng)分析回答問題：

(1)反轉(zhuǎn)錄法是基因工程中獲得目的基因的常用方法，本研究中獲取模板RNA的大豆細(xì)胞最好取自　　　，在提取RNA過程中要特別注意防止RNA的水解，試提出一種保護(hù)措施：　　　　　　　　　　　　　　　。

(2)目的基因的擴(kuò)增常采用PCR技術(shù)，而PCR引物的設(shè)計(jì)是獲得大量高純度目的基因的關(guān)鍵。引物中堿基數(shù)量越多，則引物的特異性越　　　　。

(3)下圖是本研究使用的質(zhì)粒載體pAHC25的酶切圖譜。用限制酶Sac I和BamH I同時(shí)處理pAHC25，結(jié)果會(huì)產(chǎn)生　　　種不同的片段。在構(gòu)建含PGP基因的表達(dá)載體時(shí)，分析質(zhì)粒酶切圖譜，研究人員選擇了有單一酶切點(diǎn)的限制酶Sma I和Sac I作為本研究的工具酶，其優(yōu)點(diǎn)是　　　　　　　　　　　　　　。

(4)研究人員用基因槍法轉(zhuǎn)化該小麥的幼胚細(xì)胞，選擇幼胚細(xì)胞的原因是　　　　　　　　　　，容易誘導(dǎo)形成植株。

 

Answer 1

【答案】

 （1）大豆葉肉   在低溫條件下快速提�。ɑ蚣尤脒m量的RNA酶抑制劑）

（2）高(2分)

（3）3  可以保證目的基因插入部位和方向的準(zhǔn)確（2分）

（4）分裂旺盛，全能性高

【解析】

試題分析：⑴多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGP)僅存在于大豆葉肉細(xì)胞中，獲取模板RNA的大豆細(xì)胞最好取自大豆葉肉細(xì)胞；RNA的水解需要RNA酶起作用，所以能抑制RNA酶活性的方法均可。

⑵利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前提，是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物。所以引物中堿基數(shù)目越多，特異性越強(qiáng)。

⑶在環(huán)狀質(zhì)粒pAHC25上有1個(gè)Sac I酶切位點(diǎn)和2個(gè)BamH I酶切位點(diǎn)，故這種酶同時(shí)處理pAHC25，將會(huì)使環(huán)狀質(zhì)粒出現(xiàn)三個(gè)切口，產(chǎn)生三種不同的片段；因?yàn)橄拗泼窼ma I和Sac I都只有單一酶切點(diǎn)，所以對(duì)質(zhì)粒切割后可以保證目的基因插入部位和方向的準(zhǔn)確，不會(huì)影響基因表達(dá)載體的表達(dá)。

⑷選擇幼胚細(xì)胞的原因是幼胚細(xì)胞分裂旺盛，全能性高，容易誘導(dǎo)形成植株。

考點(diǎn)：本題主要考查與基因工程相關(guān)的知識(shí)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。