Question

利用動(dòng)物乳腺生產(chǎn)產(chǎn)品的技術(shù)稱為動(dòng)物乳腺反應(yīng)器技術(shù)。2005年我省青島“嶗山奶山羊乳腺生物反應(yīng)器的研制”項(xiàng)目通過(guò)鑒定，該項(xiàng)目生產(chǎn)的藥用蛋白具有表達(dá)效率高、成本低、安全性高、易于分離純化的優(yōu)點(diǎn)，可產(chǎn)生乙肝表面抗原及抗凝血酶Ⅲ等醫(yī)藥產(chǎn)品，造福人類健康。下圖為利用生物技術(shù)獲得生物這一新品種和抗蟲(chóng)棉的過(guò)程，據(jù)圖回答：

　　⑴在基因工程中，A表示              ，如果直接從蘇云金桿菌中獲得抗蟲(chóng)基因，①過(guò)程使用的酶區(qū)別于其他酶的特點(diǎn)是            ，B表示                  。

　　⑵在研究過(guò)程中，研究人員首先從相關(guān)基因組中獲取了目的基因，并采用____     技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行了擴(kuò)增，然后將目的基因與質(zhì)粒等載體組合形成了重組載體。在重組載體的構(gòu)建過(guò)程中需要的工具酶有______________________________。

　�、腔�因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心，一個(gè)完整的基因表達(dá)載體至少包括哪些部分?                。

　　⑷將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過(guò)程中，在③過(guò)程中一般是采用          方法，在②過(guò)程中一般采用               方法，受體細(xì)胞一般是                  。

　�、捎捎谵D(zhuǎn)基因表達(dá)產(chǎn)物存在于山羊的乳汁中，檢測(cè)其體內(nèi)是否出現(xiàn)藥用蛋白，在分子水平上的檢測(cè)方法及結(jié)果是什么?                                                    。

　　⑹要確定目的的基因（抗蟲(chóng)基因）導(dǎo)入棉花細(xì)胞后，是否能穩(wěn)定遺傳并表達(dá)，需進(jìn)行檢測(cè)和鑒定工作，請(qǐng)寫出在個(gè)體水平上的鑒定過(guò)程：                                  。

Answer 1

⑴目的基因    一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列，并且在特定的位點(diǎn)上切割DNA分子 重組DNA ⑵PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）  限制酶、DNA連接酶⑶一個(gè)完整的基因表達(dá)載體至少包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因等部分。⑷農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 顯微注射技術(shù) 受精卵⑸從轉(zhuǎn)基因羊的乳汁中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原—抗體雜交 如果出現(xiàn)雜交帶，表明奶牛中出現(xiàn)了抗原蛋白；如果不出現(xiàn)雜交帶，表明奶牛中未出現(xiàn)抗原蛋白。⑹讓害蟲(chóng)吞食轉(zhuǎn)基棉花的葉子，觀察害蟲(chóng)的存活情況，以確定其是否具有抗蟲(chóng)性狀

解析:

主要考查基因工程的工具、步驟和應(yīng)用�；�因工程的工具有限制酶、DNA連接酶、運(yùn)載體等，其中限制酶具有專一性：一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列，并在特定的切點(diǎn)上切割DNA分子�；�因工程包括四個(gè)步驟：目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定。目的基因的獲取一般有3種途徑：從基因文庫(kù)中獲取目的基因；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因；通過(guò)DNA合成儀用化學(xué)方法直接人工合成。一個(gè)完整的基因表達(dá)載體至少包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因等部分�；�因基因的檢測(cè)與鑒定有四種方法：采用DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA上是否插入了目的基因，檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定（進(jìn)行抗蟲(chóng)或抗病的接種實(shí)驗(yàn)）。