Question

【題目】研究表明從母瘤分離脫落的癌細(xì)胞首先要與正常細(xì)胞粘附才能轉(zhuǎn)移。 為研究不同濃度物質(zhì) X 對(duì)癌細(xì)胞與毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞間粘附的影響，請(qǐng)根據(jù)以下提供的實(shí)驗(yàn) 材料與用具，完善實(shí)驗(yàn)思路，預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果并進(jìn)行分析與討論。

材料與用具：培養(yǎng)瓶若干個(gè)、液體培養(yǎng)基、300μg/ml 的物質(zhì) X、癌細(xì)胞細(xì)胞株、內(nèi)皮細(xì) 胞懸液、CO2 培養(yǎng)箱、PBS 溶液（用于洗去未粘附的細(xì)胞）

（要求與說明：物質(zhì) X 用液體培養(yǎng)基配制，不考慮培養(yǎng)液成分變化對(duì)培養(yǎng)物的影響；實(shí) 驗(yàn)條件適宜）

（1）實(shí)驗(yàn)思路：

①取培養(yǎng)瓶若干個(gè)均分為三組，分別加入等量且適量的液體培養(yǎng)基和內(nèi)皮細(xì)胞懸液， 置于 37℃的 CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 24h，使培養(yǎng)瓶中鋪滿單層內(nèi)皮細(xì)胞。

② ______________________________________________。

③同時(shí)分別取等量的癌細(xì)胞轉(zhuǎn)入上述培養(yǎng)瓶中。置于 37℃的 CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段 時(shí)間。

④用 PBS 溶液洗去未貼壁的細(xì)胞，測(cè)定相關(guān)值并計(jì)算細(xì)胞粘附率。

⑤___________________________________________。

（2）實(shí)驗(yàn)結(jié)果：正常對(duì)照組的粘附率為 100%，與正常對(duì)照組相比，加入物質(zhì) X 后，癌細(xì) 胞與內(nèi)皮細(xì)胞間的粘附率明顯降低，且 X 濃度越高，癌細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞間的粘附率 下降越明顯。請(qǐng)繪制柱狀圖表示上述結(jié)果___________________________ 。

（3）分析與討論

①實(shí)驗(yàn)用的癌細(xì)胞細(xì)胞株可以通過_____法建立。獲取癌細(xì)胞時(shí)需用_____________________處理癌細(xì)胞株，將癌細(xì)胞轉(zhuǎn)入含內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)瓶后所進(jìn)行的培養(yǎng)稱為______________ 培養(yǎng)。

②導(dǎo)致癌細(xì)胞從母瘤分離脫落的原因可能是_______________。根據(jù)實(shí)驗(yàn)可推測(cè)： 物質(zhì) X 可能是通過減少腫瘤細(xì)胞與毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的粘附率，來達(dá)到_______________的作用。

Answer 1

【答案】加入用液體培養(yǎng)基配制的低、高兩種不同濃度的物質(zhì) X（或濃度為 150 和 300μg/ml)，對(duì)照組加入等體積的液體培養(yǎng)基 對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析與處理 柱形圖如下： 【答題空4】克隆培養(yǎng)法 胰蛋白酶（胰酶） 傳代 癌細(xì)胞膜表面粘連蛋白（糖蛋白）減少 抑制癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移

【解析】

本題考查了探究不同濃度物質(zhì)X對(duì)癌細(xì)胞與毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞間粘附的影響，意在考察考生設(shè)置對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的能力，分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出實(shí)驗(yàn)結(jié)論的能力。

（1）實(shí)驗(yàn)思路：

①取培養(yǎng)瓶若干個(gè)均分為三組，分別加入等量且適量的液體培養(yǎng)基和內(nèi)皮細(xì)胞懸液，置于37℃的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，使培養(yǎng)瓶中鋪滿單層內(nèi)皮細(xì)胞。

②加入用液體培養(yǎng)基配制不同濃度的物質(zhì)X（濃度為150和300μg/ml），對(duì)照組加入等體積的液體培養(yǎng)基。

③同時(shí)分別取等量的癌細(xì)胞轉(zhuǎn)入上述培養(yǎng)瓶中，置于37℃的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時(shí)間。

④用PBS溶液洗去未貼壁的細(xì)胞，測(cè)定相關(guān)值并計(jì)算細(xì)胞粘附率。

⑤對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析與處理。

（2）實(shí)驗(yàn)結(jié)果：正常對(duì)照組的粘附率為100%，與正常對(duì)照組相比，加入物質(zhì)X后，癌細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞間的粘附率明顯降低，且X濃度越高，癌細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞間的粘附率下降越明顯。請(qǐng)繪制柱狀圖表示上述結(jié)果。如下：

（3）分析與討論：

①實(shí)驗(yàn)用的癌細(xì)胞細(xì)胞株可以通過克隆培養(yǎng)法建立。獲取癌細(xì)胞時(shí)需用胰蛋白酶（胰酶處理癌細(xì)胞株，將癌細(xì)胞轉(zhuǎn)入含內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)瓶后所進(jìn)行的培養(yǎng)稱為傳代培養(yǎng)。

②導(dǎo)致癌細(xì)胞從母瘤分離脫落的原因可能是癌細(xì)胞膜表面粘連蛋白（糖蛋白）減少。根據(jù)實(shí)驗(yàn)可推測(cè)：物質(zhì)X可能是通過減少腫瘤細(xì)胞與毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的粘附率，來達(dá)到抑制癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移的作用。