Question

（14分）生長因子通常是指具有刺激細(xì)胞生長的多肽類物質(zhì)，主要通過與細(xì)胞膜上特異性的受體結(jié)合，來調(diào)節(jié)細(xì)胞生長及相關(guān)的功能。請根據(jù)以下提供的實驗材料與用具，來研究內(nèi)皮生長因子（VEGF）和胎盤生長因子（PIGF）對小鼠干細(xì)胞分化的影響，完成以下問題。

實驗原理：

VEGF和PIGF均能促進(jìn)干細(xì)胞生長，干細(xì)胞分化后細(xì)胞內(nèi)      會明顯增加，可用        判斷干細(xì)胞是否分化。

實驗材料：

懷孕的小鼠，干細(xì)胞培養(yǎng)液、VEGF試劑、PIGF試劑、生理鹽水、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、檢測試劑盒、CO₂培養(yǎng)箱等。（要求與說明：答題時不考慮加入試劑后的體積變化等誤差。）

實驗思路：

（1）在　　　　條件下，取出小鼠胚胎的肝臟，用機械法剪碎至1mm³大小的組織塊，再用適當(dāng)?shù)姆椒ǐ@得干細(xì)胞懸浮液。

（2）取動物細(xì)胞培養(yǎng)瓶，平均分成若干組，并標(biāo)號，每組設(shè)置若干個重復(fù)，每個培養(yǎng)瓶　　　。

（3）　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。

（4）在　　　　　　中培養(yǎng)一段時間后，用試劑盒檢測培養(yǎng)液中Akt蛋白含量，統(tǒng)計并分析所得數(shù)據(jù)。

預(yù)測結(jié)果：請用柱形圖表示支持VEGF試劑和PIGF試劑能共同促進(jìn)小鼠干細(xì)胞分化的實驗結(jié)果。

 

Answer 1

【答案】

Akt蛋白含量    試劑盒檢測Akt蛋白含量

（1）無菌     （2）加入適量且等量的干細(xì)胞培養(yǎng)液

（3）A組：培養(yǎng)液中加適量干細(xì)胞懸浮液；B組：培養(yǎng)液中加等量干細(xì)胞懸浮液+VEGF；C組：培養(yǎng)液中加等量干細(xì)胞懸浮液+PIGF；D組：培養(yǎng)液中加等量干細(xì)胞懸浮液+VEGF+VEGF  （4）CO₂培養(yǎng)箱

預(yù)測結(jié)果：請用柱形圖表示支持VEGF試劑和PIGF試劑能共同促進(jìn)小鼠干細(xì)胞分化的實驗結(jié)果。

（畫在下框內(nèi)）

【解析】

試題分析：實驗原理：在實驗思路中提出“培養(yǎng)一段時間后，用試劑盒檢測培養(yǎng)液中Akt蛋白含量”，故推測干細(xì)胞分化后細(xì)胞內(nèi)Akt蛋白含量會增加，可用試劑盒檢測Akt蛋白含量判斷干細(xì)胞是否分化。

⑴動物細(xì)胞培養(yǎng)時，需在無菌條件下進(jìn)行。

⑵本實驗的目的是看不同條件下小鼠干細(xì)胞分化情況，應(yīng)在培養(yǎng)瓶中加入適量且等量的干細(xì)胞培養(yǎng)液。

⑶本實驗為研究內(nèi)皮生長因子（VEGF）和胎盤生長因子（PIGF）對小鼠干細(xì)胞分化的影響，故單一變量應(yīng)是內(nèi)皮生長因子（VEGF）和胎盤生長因子（PIGF）的不同。即A組：培養(yǎng)液中加適量干細(xì)胞懸浮液；B組：培養(yǎng)液中加等量干細(xì)胞懸浮液+VEGF；C組：培養(yǎng)液中加等量干細(xì)胞懸浮液+PIGF；D組：培養(yǎng)液中加等量干細(xì)胞懸浮液+VEGF+VEGF。

⑷把處理不同的各組細(xì)胞放在CO₂培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)，然后觀察細(xì)胞生長分化的情況。

預(yù)測結(jié)果：因?qū)嶒炘�理中指出“VEGF和PIGF均能促進(jìn)干細(xì)胞生長”，且在預(yù)測結(jié)果中提出“支持VEGF試劑和PIGF試劑能共同促進(jìn)小鼠干細(xì)胞分化”故小鼠干細(xì)胞分化的分化程度依次是A<B=C<D，具體圖解見答案。

考點：本題考查動物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)實驗，意在考查考生具備驗證簡單生物學(xué)事實的能力，并能對實驗現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、分析和處理。