Question

【題目】轉(zhuǎn)基因抗蟲棉是人們應(yīng)用較早的基因工程推廣項目，目前轉(zhuǎn)基因技術(shù)有了新的改進(jìn)，如圖所示，請根據(jù)所學(xué)知識回答：

（1）構(gòu)建相關(guān)的目的基因表達(dá)載體時，應(yīng)該選擇的限制酶是 ；如圖，切割目的基因兩側(cè)序列和載體時用兩種限制酶，相較使用同種限制酶而言，其優(yōu)點是，在目的基因兩側(cè)和載體切口處可能形成不同的 ，不但可以防止切割下的基因和切開的載體分別發(fā)生 ，還可以避免前者在插入載體切口處時產(chǎn)生與表達(dá)載體轉(zhuǎn)錄方向 （填“相同”或“相反”）的連接。

（2）若目的基因最終整合到染色休上，則從棉株1、2、3中各隨機(jī)取出一個葉肉細(xì)胞，其細(xì)胞核中含有的目的基因個數(shù)分別為 個。

（3）④過程通常采用 處理使染色體數(shù)恢復(fù)。取棉株2的兩個體細(xì)胞融合也能得到符合生產(chǎn)要求的棉株3，其原理為 和 。

Answer 1

【答案】

（1）EcoRl、BamH I 黏性末端 自身環(huán)化 相反

（2）0、1、2

（3）適宜濃度的秋水仙素溶液 細(xì)胞膜的流動性 植物細(xì)胞具有全能性

【解析】

（1）含有目的基因的外源DNA中有限制酶EcoRI、SamⅠ和BamHI的切割位點，但限制酶SamⅠ的切割位點位于目的基因上，不能用該酶進(jìn)行切割，因此切割獲取目的基因時應(yīng)選擇限制酶EcoRI和BamHI。用兩種限制酶切割目的基因和運載體可以分別形成兩種黏性末端，這樣不僅可以防止自身環(huán)化，還可以避免前者在插入載體切口處時產(chǎn)生與表達(dá)載體轉(zhuǎn)錄方向相反的連接。

（2）棉株l還未導(dǎo)入目的基因，因此其細(xì)胞核中不含目的基因；植株2是導(dǎo)入目的基因的單倍體植株，因此其細(xì)胞核中只含有1個目的基因； 植株3是植株2經(jīng)過人工誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍后得到的，其細(xì)胞核中含有2個目的基因。

（3）④是人工誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍，④過程通常采用適宜濃度的秋水仙素溶液處理使染色體數(shù)恢復(fù)。取棉株2的兩個體細(xì)胞融合，其原理為細(xì)胞膜的流動性；由融合細(xì)胞發(fā)育到符合生產(chǎn)要求的棉株3，其原理為植物細(xì)胞具有全能。