Question

質(zhì)粒是基因工程中常用的運(yùn)載體，存在于許多細(xì)菌及酵母菌等生物中。請(qǐng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)原理和材料用具，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)選擇運(yùn)載體質(zhì)粒，明確質(zhì)粒的抗菌素基因所控的抗菌素類別。

實(shí)驗(yàn)原理：作為運(yùn)載體的質(zhì)粒，須有標(biāo)記基因，這一標(biāo)記基因是抗菌素抗性基因，故只有具有抗菌素抗性的細(xì)菌，其質(zhì)粒才可用作運(yùn)載體。

材料用具：青霉素、四環(huán)素的10萬(wàn)單位溶液、菌種試管、滅菌的含細(xì)菌培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿、酒精燈、接種環(huán)、一次性注射器、蒸餾水、恒溫箱等。

方法步驟：

第一步：取三個(gè)含細(xì)菌培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿并標(biāo)1、2、3號(hào)，在酒精燈旁，用三支注射器分別注入1ml蒸餾水、青霉素液、四環(huán)素液，并使之在整個(gè)培養(yǎng)基表面分布均勻。

第二步：________________________________________________________.            

第三步：________________________________________________________.

      預(yù)期結(jié)果：

①________________________________________________________

②________________________________________________________                   

③________________________________________________________

④________________________________________________________

⑤________________________________________________________

Answer 1

第二步：將接種環(huán)在酒精燈上灼燒，并在酒精燈火旁取菌種，對(duì)三個(gè)培養(yǎng)皿分別接種；第三步：將接種后的三個(gè)培養(yǎng)皿放入37℃恒溫箱培養(yǎng)24小時(shí)。

預(yù)期結(jié)果：

①1號(hào)培養(yǎng)皿細(xì)菌正常生長(zhǎng)；

②2、3號(hào)培養(yǎng)皿中，僅2中細(xì)菌能存活，說(shuō)明細(xì)菌有青霉素抗性基因，而沒(méi)有四環(huán)素抗性基因。

③2、3號(hào)培養(yǎng)皿中，僅3中細(xì)菌能存活，說(shuō)明細(xì)菌有四環(huán)素抗性基因，而沒(méi)有青霉素抗性基因。

④2、3號(hào)培養(yǎng)皿中都有存活，說(shuō)明該菌質(zhì)粒上有兩種抗菌素的抗性基因。

⑤2、3號(hào)培養(yǎng)皿中都不存活，說(shuō)明該菌質(zhì)粒上沒(méi)有這兩種抗菌素的抗性基因。

解析:

細(xì)菌的抗藥性基因位于細(xì)菌的質(zhì)粒上。從題中所給條件看，在材料用具僅提供了青霉素、四環(huán)素兩種抗生素的試劑，其題意就是要鑒定步驟一中所給細(xì)菌是否含有抗青霉素、抗四環(huán)素基因。由于此設(shè)計(jì)中要求要驗(yàn)證兩種抗生素抗性基因，屬于同時(shí)驗(yàn)證2個(gè)變量的情況，故實(shí)驗(yàn)組應(yīng)設(shè)計(jì)為2組，加上空白對(duì)照組，共3個(gè)組。