利用PCR技術(shù)擴增目的基因是目的基因獲取的常用方法之一。現(xiàn)有目的基因“X基因”，它是DNA分子上一個有遺傳效應(yīng)的片段，若要用PCR技術(shù)特異性地拷貝“X基因”，需在PCR反應(yīng)中加入兩種引物，兩種引物及其與模板鏈的結(jié)合位置如圖1所示。經(jīng)4輪循環(huán)后產(chǎn)物中有五種不同的DNA分子，如圖2所示。

（1）獲取目的基因是實施基因工程的第一步，基因工程的核心步驟是      ，基因工程的原理是     。目的基因的獲取除利用PCR技術(shù)擴增外，還可以從基因文庫中獲取�；蛭膸彀琠___和____等類型，前者的基因中含有啟動子。。
（2）PCR的原理是____。PCR擴增的過程一般是：95℃下使模板DNA變性、解鏈→55℃下復(fù)性（引物與DNA模板鏈結(jié)合）→72℃下引物鏈延伸（形成新的脫氧核苷酸鏈）。變性過程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對之間的____，該過程在細胞內(nèi)也可利用____酶實現(xiàn)。復(fù)性過程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合是依靠    完成。在采用常規(guī)PCR方法擴增目的基因的過程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物體內(nèi)的DNA聚合酶，其最主要的特點是
               。
  （3）至少需要循環(huán)一～輪，圖2所示的五種不同的DNA分子在產(chǎn)物中才都會出現(xiàn)。經(jīng)4輪循環(huán)后，圖中④、⑤所示的DNA分子數(shù)分別占DNA分子總數(shù)的比例為      和    。

練習冊系列答案
相關(guān)習題

科目：高中生物 來源：2011-2012學年福建省上杭一中高二下學期期末考試生物試卷（帶解析） 題型：綜合題

T-DNA可能隨機插入植物基因組內(nèi)，導致被插入基因發(fā)生突變。用此方法誘導擬南芥產(chǎn)生突變體的過程如下：種植野生型擬南芥，待植物形成花蕾時，將地上部分浸入農(nóng)桿菌（其中的T-DNA上帶有抗除草劑基因）懸浮液中以實現(xiàn)轉(zhuǎn)化。在適宜條件下培養(yǎng)，收獲種子（稱為T1代）。

環(huán)狀DNA示意圖
A、B、C、D表示能與相應(yīng)T—DNA鏈
互補、長度相等的單鏈DNA片段；
箭頭指示DNA合成方向。
（1）為篩選出已轉(zhuǎn)化的個體，需將T1代播種在含         的培養(yǎng)基上生長，成熟后目交，收獲種子（稱為T2代）。
（2）為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將T2代播種在含         的培養(yǎng)基上，獲得所需個體。 
（3）經(jīng)過多代種植獲得能穩(wěn)定遺傳的抗鹽突變體。為確定抗鹽性狀是否由單基因突變引起，需將該突變體與         植株進行雜交，再自交         代后統(tǒng)計性狀分離比。
（4）若上述T-DNA的插入造成了基因功能喪失，從該突變體的表現(xiàn)型可以推測野生型基因的存在導致植物的抗鹽性         。
（5）根據(jù)T-DNA的已知序列，利用PCR技術(shù)可以擴增出被插入的基因片段。
其過程是：提取         植株的DNA，用限制酶處理后，再用         將獲得的DNA片段連接成環(huán)（如下圖）。以此為模板，從圖中A、B、C、D四種單鏈DNA片斷中選取         作為引物進行擴增，得到的片斷將用于獲取該基因的全序列信息。

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科目：高中生物 來源：2013屆福建省高二下學期期末考試生物試卷（解析版） 題型：綜合題

 T-DNA可能隨機插入植物基因組內(nèi)，導致被插入基因發(fā)生突變。用此方法誘導擬南芥產(chǎn)生突變體的過程如下：種植野生型擬南芥，待植物形成花蕾時，將地上部分浸入農(nóng)桿菌（其中的T-DNA上帶有抗除草劑基因）懸浮液中以實現(xiàn)轉(zhuǎn)化。在適宜條件下培養(yǎng)，收獲種子（稱為T1代）。

環(huán)狀DNA示意圖

A、B、C、D表示能與相應(yīng)T—DNA鏈

互補、長度相等的單鏈DNA片段；

箭頭指示DNA合成方向。

    （1）為篩選出已轉(zhuǎn)化的個體，需將T1代播種在含          的培養(yǎng)基上生長，成熟后目交，收獲種子（稱為T2代）。

（2）為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將T2代播種在含          的培養(yǎng)基上，獲得所需個體。 

    （3）經(jīng)過多代種植獲得能穩(wěn)定遺傳的抗鹽突變體。為確定抗鹽性狀是否由單基因突變引起，需將該突變體與          植株進行雜交，再自交          代后統(tǒng)計性狀分離比。

    （4）若上述T-DNA的插入造成了基因功能喪失，從該突變體的表現(xiàn)型可以推測野生型基因的存在導致植物的抗鹽性          。

    （5）根據(jù)T-DNA的已知序列，利用PCR技術(shù)可以擴增出被插入的基因片段。

其過程是：提取          植株的DNA，用限制酶處理后，再用          將獲得的DNA片段連接成環(huán)（如下圖）。以此為模板，從圖中A、B、C、D四種單鏈DNA片斷中選取          作為引物進行擴增，得到的片斷將用于獲取該基因的全序列信息。

 

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