Question

運(yùn)用動物體細(xì)胞雜交技術(shù)可實(shí)現(xiàn)基因定位。研究發(fā)現(xiàn)：用人的細(xì)胞與小鼠體細(xì)胞進(jìn)行雜交得到的雜種細(xì)胞含有雙方的染色體。雜種細(xì)胞在持續(xù)分裂過程中僅保留鼠的染色體而人類染色體則逐漸丟失，只剩一條或幾條。右圖是人的缺乏 HGPRT 酶突變細(xì)胞株（ HGPRT^-）和小鼠的缺乏 TK 酶細(xì)胞株（TK^-）融合后并在 HAT 培養(yǎng)液中培養(yǎng)的過程，結(jié)果表明最終人的染色體在融合細(xì)胞中僅存有 3 號染色體或 17 號染色體或兩者都有。已知只有同時(shí)具有 HGPRT 酶和 TK 酶的融合細(xì)胞才可在 HAT 培養(yǎng)液中長期存活與繁殖。

⑴體細(xì)胞雜交克服了     ▲     ，過程①常用的生物方法是     ▲     。

⑵過程②中，為了防止細(xì)菌的污染，所用培養(yǎng)液應(yīng)該添加一定量的     ▲     ，此外還要定期用     ▲     處理細(xì)胞，使貼壁生長的細(xì)胞脫落形成細(xì)胞懸液。

⑶從培養(yǎng)過程看HAT 培養(yǎng)液不僅能提供養(yǎng)料，還起     ▲     作用。

⑷從圖示結(jié)果看，可以確定人的     ▲     基因位于     ▲     號染色體；該方法可以對鼠基因定位嗎？     ▲     。

 

Answer 1

【答案】

⑴遠(yuǎn)緣雜交不親和（或生殖隔離）   用滅活的（仙臺／動物）病毒誘導(dǎo)融合   ⑵抗生素      胰蛋白酶 ⑶選擇（篩選） ⑷ TK 酶  17   不能

【解析】這是利用動物細(xì)胞融合進(jìn)行染色體上基因定位的應(yīng)用實(shí)例。題中，選擇融合的人與鼠的細(xì)胞，分別是人的缺乏 HGPRT 酶突變細(xì)胞株（ HGPRT - ）和小鼠的缺乏 TK 酶細(xì)胞株（ TK 一）。由于融合后的細(xì)胞，鼠的染色體全部保留了下來，因此融合細(xì)胞不會缺少HGPRT酶，是否缺乏TK酶，取決于人的決定TK酶基因的染色體是否在融合后會缺失。由于能夠在HTA培養(yǎng)液中長期存在與繁殖的必須是同時(shí)含有HGPRT酶和TK酶的，如果融合細(xì)胞沒有保留人細(xì)胞中決定TK酶基因的染色體，融合細(xì)胞將無法存在與繁殖；如果融合細(xì)胞獲得了人細(xì)胞中決定TK酶基因的染色體，則可以在培養(yǎng)液中存活。從題中圖示信息可知，融合細(xì)胞必須含有人細(xì)胞中的17號染色體，這說明了人的17號染色體上含有TK酶的決定基因。在這一實(shí)驗(yàn)過程中，HAT培養(yǎng)液不僅提供了融合細(xì)胞生存的條件，也起到了從混合細(xì)胞中篩選出同時(shí)含有HGPRT酶和TK酶的融合細(xì)胞的作用。