Question

【題目】胃癌是我國(guó)發(fā)生率很高的一種惡性疾病，制備抑制胃癌細(xì)胞增殖的單克隆抗體對(duì)治療胃癌具有重要意義。抗胃癌單克隆抗體制備過(guò)程如下圖，回答下列問(wèn)題：

（1）單克隆抗體制備的原理是______________和細(xì)胞增殖，圖中注射的甲表示______________。

（2）與植物體細(xì)胞雜交過(guò)程相比，步驟①特有的處理方法是______________，步驟②常用特定的________培養(yǎng)基對(duì)乙進(jìn)行篩選，使只有融合的雜種細(xì)胞才能生長(zhǎng)。

（3）為篩選出丁，需將丙放入含有5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，其中CO2的主要作用是__________，然后通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞是否產(chǎn)生所需的______________，篩選出丁。

（4）步驟④中可以將丁在體外條件或小鼠腹腔中培養(yǎng)，然后從______________或______________中，提取出大量的單克隆抗體。

Answer 1

【答案】細(xì)胞膜的流動(dòng)性 人的胃癌細(xì)胞 用滅活的病毒促融 選擇 維持培養(yǎng)液的pH （專一）抗體 （細(xì)胞）培養(yǎng)液 （小鼠）腹水

【解析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

（1）單克隆抗體制備過(guò)程中要用到動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖，動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性。該過(guò)程中的目的是制備抑制胃癌細(xì)胞增殖的單克隆抗體，因此注射的甲表示人的胃癌細(xì)胞。

（2）誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合，可用的誘導(dǎo)方法有物理法（離心、振動(dòng)、電激）、化學(xué)法（聚乙二醇）、生物法（滅活的病毒）。與植物體細(xì)胞雜交過(guò)程相比，步驟①誘導(dǎo)融合特有的處理方法是用滅活的病毒處理，步驟②為篩選雜交瘤細(xì)胞，常用特定的選擇培養(yǎng)基對(duì)乙（融合后的細(xì)胞）進(jìn)行篩選，使只有融合的雜種細(xì)胞才能生長(zhǎng)。

（3）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要一定的氣體環(huán)境，包括95%的空氣和5%CO2，其中CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞是否產(chǎn)生所需的（專一）抗體，篩選出能產(chǎn)生特異性抗體又能無(wú)限增殖的細(xì)胞丁。

（4）步驟④中可以將丁在體外條件或小鼠腹腔中培養(yǎng)，然后從（細(xì)胞）培養(yǎng)液或（小鼠）腹水中，提取出大量的單克隆抗體。