Question

【題目】研究人員從血管內(nèi)皮瘤中發(fā)現(xiàn)了一種新的血管增生抑制劑——內(nèi)皮抑素，它能有效地抑制 血管增生，他們利用基因工程技術(shù)，將內(nèi)皮抑素基因轉(zhuǎn)移到了酵母菌中使之表達(dá)并分泌，圖 示 EcoRⅠ、BamHⅠ、PstⅠ三種限制酶在質(zhì)粒和含內(nèi)皮抑素基因的外源 DNA 片段上的切 割位點(diǎn)，回答下列問題：

（1）根據(jù)上述信息，該基因工程技術(shù)的目的基因_____，為與質(zhì)粒 DNA重組，目的基因和質(zhì)粒 DNA 均應(yīng)用限制酶_____切割。

（2）下列關(guān)于質(zhì)粒運(yùn)載體的說(shuō)法錯(cuò)誤的是（________）

A．使用質(zhì)粒運(yùn)載體是為了避免目的基因被分解

B．質(zhì)粒運(yùn)載體只能在與目的基因重組后進(jìn)入細(xì)胞

C．質(zhì)粒運(yùn)載體可能是從細(xì)菌或者病毒的 DNA 改造的

D．質(zhì)粒運(yùn)載體的復(fù)制和表達(dá)也遵循中心法則

E．質(zhì)粒運(yùn)載體只有把目的基因整合到受體細(xì)胞的 DNA 中才能表達(dá) F．沒有限制酶就無(wú)法使用質(zhì)粒運(yùn)載體

（3）若內(nèi)皮抑素是一種酶，制備的合理工藝步驟應(yīng)為_____(選擇正確的序號(hào)并排序)。

①過濾 ②沉淀 ③破碎 ④干燥 ⑤提純

（4）固定化酶是從 20 世紀(jì) 60 年代迅速發(fā)展起來(lái)的一種技術(shù)。東北農(nóng)業(yè)大學(xué)科研人員 利用雙重固定法，即采用戊二醛作交聯(lián)劑(使酶相互連接)，海藻酸鈉作為包埋劑來(lái)固定小麥 酯酶，研究固定化酶的性質(zhì)，并對(duì)其最佳固定條件進(jìn)行了探究。圖顯示的是部分研究結(jié) 果(注：酶活力為固定化酶催化化學(xué)反應(yīng)的總效率，包括酶活性和酶的數(shù)量)。

從甲圖所示結(jié)果可以得出的結(jié)論是________, 乙圖曲線表明濃度為_____的海藻酸鈉包埋效果最好，當(dāng)海藻酸鈉濃度較低時(shí)，酶活 力較低原因可能是_________。

Answer 1

【答案】內(nèi)皮抑素基因 BamHⅠ B C E ①②⑤④ 固定化酯酶比游離酯酶對(duì)溫度的變化適應(yīng)性和酶活力更強(qiáng) 3% 海藻酸鈉濃度較低時(shí)包埋不緊密，酶分子容易漏出，數(shù)量不足

【解析】

1-3題考查了基因工程技術(shù)，目的基因的獲得方法有三種：從基因文庫(kù)中獲取、PCR技術(shù)擴(kuò)增、人工合成法；基因表達(dá)載體中的LacZ基因被插入滅活。

4題考查固定化酶技術(shù)，圖甲中固定化酶與游離酶相比，對(duì)溫度變化的適應(yīng)性更強(qiáng)且應(yīng)用范圍較廣。圖乙曲線表明濃度為3%的海藻酸鈉包埋效果最好，此時(shí)的酶活力最高；當(dāng)海藻酸鈉濃度較低時(shí)包埋不緊密，酶分子容易漏出，數(shù)量不足，因此酶活力較低。如果制作的凝膠珠顏色過淺，呈白色，則說(shuō)明海藻酸鈉濃度過低。

（1）由題意知：內(nèi)皮抑素基因?qū)儆谠摶�因工程的目的基因，為與質(zhì)粒DNA重組，目的基因和質(zhì)粒DNA均應(yīng)用限制酶BamHI切割，暴露相同的黏性末端。

（2）A．使用質(zhì)粒運(yùn)載體是為了避免目的基因被分解，A正確；

B、無(wú)論與目的基因重組與否，質(zhì)粒運(yùn)載體都能進(jìn)入宿主細(xì)胞，B錯(cuò)誤；

C、質(zhì)粒通常是來(lái)自細(xì)菌，病毒沒有質(zhì)粒，因此質(zhì)粒運(yùn)載體可能是從細(xì)菌的DNA改造形成的，C錯(cuò)誤；

D、質(zhì)粒運(yùn)載體的復(fù)制和表達(dá)也遵循中心法則，D正確。

E、質(zhì)粒運(yùn)載體在受體細(xì)胞的DNA中能獨(dú)立表達(dá)，E錯(cuò)誤；

F、質(zhì)粒作為運(yùn)載體，必須有限制酶的切割位點(diǎn)，才能與目的基因整合重組，F正確。

故選BCE。

（3）酶制備的合理工藝步驟應(yīng)為①過濾→②沉淀→⑤提純→④干燥。

（4）通過分析圖甲可知，固定化酶與游離酶相比，對(duì)溫度變化的適應(yīng)性更強(qiáng)且應(yīng)用范圍較廣，圖乙曲線表明濃度為3%的海藻酸鈉包埋效果最好，此時(shí)酶活力最高。當(dāng)海藻酸鈉濃度較低時(shí)包埋不緊密，酶分子容易漏出，數(shù)量不足，因此酶活力較低