Question

【題目】某同學(xué)對(duì)“血紅蛋白的提取和分離”實(shí)驗(yàn)進(jìn)行改進(jìn)和研究，實(shí)驗(yàn)步驟如圖1所示。請(qǐng)回答下列問題：

（1）血紅蛋白由4條肽鏈組成，包括_________________，血紅蛋白因含有_______而呈紅色，這有利于對(duì)提取過程的監(jiān)測(cè)。

（2）洗滌紅細(xì)胞的目的是____________________________。將樣品稀釋后轉(zhuǎn)移至離心管中，離心后選取_______（填“上層”或“下層”）暗紅色的紅細(xì)胞液體并將其轉(zhuǎn)人燒杯中，加入5倍體積的______________進(jìn)行洗滌。

（3）待紅細(xì)胞破裂釋放血紅蛋白后，將得到的混合溶液充分?jǐn)嚢璨㈦x心，結(jié)果如圖2所示。血紅蛋白分布在圖2的_______（填序號(hào)）層，用濾紙過濾，可得到含血紅蛋白的濾液。

（4）將濾液裝入透析袋中，可除去_______的雜質(zhì)。

Answer 1

【答案】2條α一肽鏈和2條β肽鏈 血紅素 去除雜蛋白，以利于血紅蛋白的分離和純化 下層 生理鹽水 ③ 分子量較小

【解析】

1、血紅蛋白的提取與分離的實(shí)驗(yàn)步驟主要有：
（1）樣品處理：①紅細(xì)胞的洗滌，②血紅蛋白的釋放，③分離血紅蛋白溶液；
（2）粗分離：①分離血紅蛋白溶液，②透析；
（3）純化：調(diào)節(jié)緩沖液面→加入蛋白質(zhì)樣品→調(diào)節(jié)緩沖液面→洗脫→收集分裝蛋白質(zhì)；
（4）純度鑒定--SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。
2、將攪拌好的混合液轉(zhuǎn)移到離心管中，離心后，可以明顯看到試管中的溶液分為4層，從上向下依次是有機(jī)溶劑層、脂類物質(zhì)層、紅細(xì)胞破碎物沉淀層，即第三層為紅色透明的血紅蛋白溶液層。

（1）血紅蛋白由4條肽鏈組成，包括2條α肽鏈和2條β肽鏈；血紅蛋白因含有血紅素而呈紅色，這有利于對(duì)提取過程的觀察及監(jiān)測(cè)。
（2）紅細(xì)胞浸潤(rùn)在血漿中，血漿中含豐富的血漿蛋白，洗滌紅細(xì)胞的目的是去除雜蛋白，以利于血紅蛋白的分離和純化；將樣品稀釋后轉(zhuǎn)移至離心管中，離心后選取下層暗紅色的紅細(xì)胞液體并將其轉(zhuǎn)入燒杯中，加入5倍體積的生理鹽水進(jìn)行洗滌。
（3）將攪拌好的混合液轉(zhuǎn)移到離心管中，離心后，可以明顯看到試管中的溶液分為4層，從上向下依次是有機(jī)溶劑層、脂類物質(zhì)層、血紅蛋白溶液和紅細(xì)胞破碎物沉淀層，即第三層為紅色透明的血紅蛋白溶液層，由分析可知，血紅蛋白分布在圖2的③層。
（4）將濾液裝入透析袋中，透析袋具有選擇透過性，分子量小的可以通過，分子量大的蛋白質(zhì)等則不能通過，故透析可除去分子量較小的雜質(zhì)。