Question

從自然界微生物中篩選某菌種的一般步驟是：采集菌樣→富集培養(yǎng)→純種分離→性能測(cè)定。富集培養(yǎng)指創(chuàng)設(shè)僅適合待分離微生物旺盛生長(zhǎng)的特定環(huán)境條件，使其群落的數(shù)量大大增加，從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法。

（1）接種前要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行____________處理。在整個(gè)微生物的分離和培養(yǎng)過程中，一定要注意在____________條件下進(jìn)行。

（2）不同微生物的生存環(huán)境不同，獲得理想微生物的第一步是從適合的環(huán)境采集菌樣，然后再按一定的方法分離、純化。如培養(yǎng)纖維素分解菌的菌樣應(yīng)從___________環(huán)境中采集。

（3）從土壤中篩選纖維素分解菌需要配制          培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中需要加入纖維素粉作為唯一的             。

（4）經(jīng)過梯度稀釋后，要將樣品均勻涂布在用于鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上，在該培養(yǎng)基中需要加入的特殊染料是            ，當(dāng)形成菌落以后可以根據(jù)菌落周圍是否產(chǎn)生_____________來篩選纖維素分解菌。某同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是__________________________________。

 

Answer 1

【答案】

（1）高壓蒸汽滅菌（1分）　    無(wú)菌     （2）富含纖維素   （3）選擇    碳源

（4）剛果紅   透明圈　  菌液濃度過高（土壤溶液稀釋不夠）

【解析】

試題分析：微生物培養(yǎng)的程序：a．器具的滅菌、b．培養(yǎng)基的配制、c．培養(yǎng)基的滅菌、倒平板、d．微生物接種、e．恒溫箱中培養(yǎng)、f．菌種的保存；在培養(yǎng)的過程中一定要注意無(wú)菌操作。選擇培養(yǎng)基：選擇培養(yǎng)基是根據(jù)不同微生物在代謝過程中所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境不同而配制的。不同微生物對(duì)某些化學(xué)藥品的抵抗力不同。利用這些特點(diǎn)，我們便可配制出適于某些微生物生長(zhǎng)而抑制其他微生物的選擇培養(yǎng)基，例如從土壤中分離放線菌時(shí)，可在培養(yǎng)基中加入10%的酚數(shù)滴，抑制細(xì)菌和真菌的生長(zhǎng)；根據(jù)對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的特殊的需求，可以選擇不同的微生物，比如尿素分解菌的氮源是尿素，纖維素分解菌的碳源是纖維素。剛果紅染色法篩選纖維素分解菌的原理：剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)我們?cè)诤�有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時(shí)，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素的復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。這樣，我們就可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。（1）微生物的培養(yǎng)最重要的程序之一就是防止雜菌的污染，防止雜菌的污染首先要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌處理，培養(yǎng)基滅菌的方式是高壓蒸汽滅菌法；在微生物接種的操作中也要注意無(wú)菌操作。（2）分離纖維素分解菌要從富含纖維素的環(huán)境中尋找，以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基上進(jìn)行選擇，就可以分離到纖維素分解菌。（3）以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。（4）剛果紅可以和纖維結(jié)合形成紅色復(fù)合物，纖維素分解菌將纖維素分解以后，紅色復(fù)合物消失，會(huì)形成透明圈；純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃度過高（土壤溶液稀釋不夠）。

考點(diǎn)：主要考查對(duì)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)，探究：影響酶活性的條件等考點(diǎn)的理解。