Question

【題目】回答下列（一）、（二）小題：

（一）回答下列《生物技術(shù)實(shí)踐》有關(guān)問題：

（1）高壓蒸汽滅菌鍋滅菌，開始加熱時(shí)要打開排氣閥、關(guān)閉安全閥，其目的是為了_________，以避免鍋內(nèi)達(dá)不到預(yù)設(shè)的溫度或壓力。

（2）葡萄酒呈現(xiàn)深紅色的原因是_________。發(fā)酵完成后，將發(fā)酵液用_________過濾，除去葡萄皮和籽；釀果酒時(shí)，加蔗糖是為了_________。

（3）在制作泡菜測(cè)定亞硝酸鹽含量時(shí)，顯色劑是由10g/L的對(duì)氨基苯磺酸和1g/L的N-1-萘基乙二胺_________混合而成，泡菜打成勻漿前，_________（填不需要/需要）用清水沖洗；泡菜腌制過程中若泡菜壇有砂眼，常導(dǎo)致腌制的蔬菜臭而不酸，其原因可能是_________條件下乳酸菌不發(fā)酵，而其它雜菌繁殖后導(dǎo)致蔬菜腐敗發(fā)臭。泡菜制作過程中影響亞硝酸鹽含量的因素有_________等（寫出兩點(diǎn)）。

（二）藥用植物是一類具有特殊用途的經(jīng)濟(jì)植物，對(duì)人類健康具有重要的醫(yī)療和保健作用。藥用植物的品種改良工作引起了科研人員的重視。請(qǐng)回答下列問題：

（1）科研人員通過對(duì)植物_________的培養(yǎng)進(jìn)行單倍體克隆。為鑒定單倍體植株，可通過制作臨時(shí)裝片觀察_________來確定。

（2）人參皂甙具有抗腫瘤等作用，科研人員設(shè)計(jì)如圖1所示流程制備人參皂甙Rg3，并研究過程③生物反應(yīng)器中人參細(xì)胞產(chǎn)量、人參皂甙Rg3產(chǎn)量隨培養(yǎng)時(shí)間的變化，結(jié)果如圖2。

圖1中的過程②常將愈傷組織進(jìn)行懸浮培養(yǎng)得到X，X是_________，實(shí)現(xiàn)了能產(chǎn)生人參皂甙Rg3的細(xì)胞克隆及其工業(yè)化生產(chǎn)。由圖2可知，影響人參皂甙Rg3產(chǎn)量的因素是_________。

（3）東莨菪堿是從東莨菪中分離出來的可用于麻醉鎮(zhèn)痛、止咳、平喘。將莨菪中提取到天仙子胺6β羧化酶基因轉(zhuǎn)入顛茄中，轉(zhuǎn)基因顛茄能夠產(chǎn)生大量的東莨菪堿。構(gòu)建該目的基因的基因文庫(kù)需要用到的工具酶是_____，然后用_________從該基因文庫(kù)中選擇、釣取。含目的基因的農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞時(shí)，加入農(nóng)桿菌培養(yǎng)液中的植物組織往往切成許多小塊，這種創(chuàng)傷刺激的意義是_________（寫出兩點(diǎn)）。

Answer 1

【答案】排走冷空氣 發(fā)酵過程中葡萄皮的色素進(jìn)入到發(fā)酵液中 兩層紗布 增加酒精含量與糖含量 等體積 不需要 有氧 溫度、食鹽用量和腌制時(shí)間等 花藥（或花粉） 有絲分裂中期的染色體數(shù)目 細(xì)胞系（或細(xì)胞株） 培養(yǎng)時(shí)間、人參細(xì)胞產(chǎn)量（或細(xì)胞數(shù)量、密度） 限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶 基因探針（或核酸探針、單抗特異探針） 釋放信號(hào)分子、吸引農(nóng)桿菌；促進(jìn)脫分化有利于形成愈傷組織

【解析】

（1）在葡萄酒自然發(fā)酵的過程中,起主要作用的是附著在葡萄皮表面的野生型酵母菌；葡萄酒呈現(xiàn)深紅色的原因：在發(fā)酵過程中,隨著酒精濃度的提高,紅葡萄皮的色素也進(jìn)入發(fā)酵液，在缺氧，呈酸性的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長(zhǎng)繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到制約。（2）測(cè)定亞硝酸鹽含量的方法是：比色法，原理是在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對(duì)基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與 N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料，與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)顯色液目測(cè)比較，估算泡菜中亞硝酸鹽含量。腌制的條件：在腌制過程中要注意控制腌制的時(shí)間、溫度和食鹽的用量。溫度過高、食鹽用量不足10%、腌制時(shí)間過短，容易造成細(xì)菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加。一般在腌制10天后，亞硝酸鹽的含量開始下降。

（一）（1）高壓蒸汽滅菌鍋滅菌，開始加熱時(shí)要打開排氣閥、關(guān)閉安全閥，其目的是為了使水沸騰，排出鍋內(nèi)的冷空氣，以避免鍋內(nèi)達(dá)不到預(yù)設(shè)的溫度或壓力。

（2）在發(fā)酵過程中，隨著酒精度數(shù)的提高，紅葡萄皮的色素也進(jìn)入發(fā)酵液，使葡萄酒呈現(xiàn)深紅色；發(fā)酵完成后，將發(fā)酵液用兩層紗布過濾，除去葡萄皮和籽；釀果酒時(shí)，加蔗糖是為了增加酒精含量和糖含量。

（3）顯色劑是由10g/L的對(duì)氨基苯磺酸和1g/L的N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽等體積混合而成，泡菜打成勻漿前，不需要用清水沖洗，若沖洗會(huì)將乳酸菌菌種沖洗掉；乳酸菌是厭氧菌，若泡菜腌制過程中泡菜壇有砂眼，導(dǎo)致氧氣含量增加，有氧條件下乳酸菌不發(fā)酵，而其他雜菌繁殖后導(dǎo)致蔬菜腐敗發(fā)臭。泡菜制作過程中要注意控制腌制的時(shí)間、溫度和食鹽的用量。如果溫度過高、食鹽用量過低、腌制時(shí)間過短，亞硝酸鹽含量會(huì)增加。

（二）（1）科研人員通過對(duì)植物花粉的培養(yǎng)進(jìn)行單倍體克��；染色體在光學(xué)顯微鏡下清晰可見，所以為鑒定單倍體植株，可通過制作臨時(shí)裝片觀察有絲分裂中期的染色體數(shù)目來確定。

（2）圖1中的過程②常將愈傷組織進(jìn)行懸浮培養(yǎng)得到X，X是細(xì)胞株，實(shí)現(xiàn)了能產(chǎn)生人參皂甙Rg3的細(xì)胞克隆及其工業(yè)化生產(chǎn)。由圖2可知，隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，人參細(xì)胞的數(shù)量先增加后穩(wěn)定；人參皂甙Rg3產(chǎn)量先增加后穩(wěn)定，故影響人參皂甙產(chǎn)量的因素有人參細(xì)胞的數(shù)量和培養(yǎng)時(shí)間。

（3）構(gòu)建該目的基因的基因文庫(kù)需要用到的工具酶是限制酶和DNA連接酶，然后用基因探針從該基因文庫(kù)中選擇、釣取。含目的基因的農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞時(shí)，加入農(nóng)桿菌培養(yǎng)液中的植物組織往往切成許多小塊，這種創(chuàng)傷刺激可以釋放信號(hào)分子、吸引農(nóng)桿菌；促進(jìn)脫分化有利于形成愈傷組織。