Question

【題目】科研人員利用胚胎干細胞（ES細胞）對干擾素基因缺失小鼠進行基因治療。其技術流程如圖所示，請回答相關問題：

（1）過程①獲得重組胚胎之前需要通過___________技術獲得重組細胞，通過顯微操作去除MⅡ期卵母細胞中的核，用微型吸管可一并吸出______________________。

（2）步驟②中，重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時，可從其________________分離出ES細胞。步驟③中，需要構建含有干擾素基因的________________。構建之前可以利用PCR技術對目的基因進行擴增，PCR技術的原理是___________。

（3）將基因導入ES細胞常用的方法是_____________。體外誘導ES細胞向不同方向分化是利用了ES細胞的___________。

（4）為檢測干擾素基因的轉錄情況，可采用___________方法，若有雜交帶出現(xiàn)，表明目的基因已成功轉錄出mRNA。

Answer 1

【答案】 核移植 細胞核和第一極體 內細胞團 （基因）表達載體 DNA雙鏈復制 顯微注射 全能性 分子雜交技術

【解析】試題分析：分析題圖：圖示是利用胚胎干細胞（ES細胞）對干擾素基因缺失小鼠進行基因治療的流程，其中①表示通過核移植技術獲得重組胚胎的過程；②表示早期胚胎培養(yǎng)過程；③表示采用基因工程技術將目的基因導入受體細胞的過程。

（1）根據(jù)以上分析已知，①表示通過核移植技術獲得重組胚胎的過程；核移植前要先用顯微操作的方法去除卵母細胞的細胞核，并將第一極體也一并除去。

（2）ES細胞可以從囊胚的內細胞團中分離出來；步驟③將目的基因導入受體細胞時，需要先構建含有目的基因（干擾素基因）的表達載體；PCR技術可在體外大量擴增目的基因，其原理是DNA雙鏈復制。

（3）將目的基因導入ES細胞（動物細胞）最有效的方法是顯微注射法；體外誘導ES細胞向不同方向分化是利用了ES細胞的全能性。

（4）檢測干擾素基因的轉錄情況，，可采用分子雜交技術，若有雜交帶出現(xiàn)，表明目的基因已成功轉錄出mRNA。