Question

【題目】某轉(zhuǎn)基因抗病植物的培育過程如圖1所示，圖2表示PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ和ApaⅠ四種限制酶的識(shí)別序列及酶切位點(diǎn)。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：

（1）圖中限制酶切割DNA時(shí)破壞的是兩個(gè)___之間的化學(xué)鍵。

（2）在構(gòu)建圖1中的重組質(zhì)粒時(shí)要保證目的基因被連接在質(zhì)粒上特定的____和終止子之間才能保證目的基因在受體細(xì)胞中被成功_________。

（3）將抗病基因從含抗病基因的DNA中切割下來，使用的限制酶是___，同時(shí)也應(yīng)該用相同的酶對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行切割，這樣處理的原因是_______。請(qǐng)寫出單獨(dú)用PstⅠ切割質(zhì)粒后的片段： ________。

（4）轉(zhuǎn)基因抗病植物的培育是否發(fā)生了可遺傳變異？________。藥物A會(huì)抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)，根據(jù)這一原理可以利用含藥物A的培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞。由此推斷，重組質(zhì)粒中應(yīng)含有________基因作為標(biāo)記基因。

Answer 1

【答案】脫氧(核糖)核苷酸 啟動(dòng)子 轉(zhuǎn)錄（或者填表達(dá)） PstⅠ和EcoRⅠ 用相同的酶切割質(zhì)粒才能產(chǎn)生與目的基因相同的末端，便于二者進(jìn)行拼接 是 抗藥物A

【解析】

分析題圖：含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位點(diǎn)，其中SmaⅠ酶的切割位點(diǎn)位于抗病基因（目的基因）上；質(zhì)粒含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ的切割位點(diǎn)。所以要獲得重組質(zhì)粒，可以用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ對(duì)目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行切割。

（1）限制酶切割的是DNA分子中特定的兩個(gè)脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵。

（2）為了保證目的基因在受體細(xì)胞中能夠成功表達(dá)（或轉(zhuǎn)錄），在構(gòu)建圖1中的重組質(zhì)粒時(shí)，目的基因上游和下游必須連接有特定的啟動(dòng)子和終止子。

（3）根據(jù)以上分析已知，切割圖示目的基因和質(zhì)粒采用的限制酶都是PstⅠ和EcoRⅠ，這樣才能使得質(zhì)粒和目的基因的兩端具有相同的粘性末端，便于二者進(jìn)行正確的拼接。根據(jù)圖2分析限制酶的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)可知，單獨(dú)用PstⅠ切割質(zhì)粒后的片段為：。

（4）轉(zhuǎn)基因技術(shù)的原理是基因重組，屬于可遺傳變異；根據(jù)題意分析，欲利用含藥物A的培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因（目的基因或重組質(zhì)粒）的香蕉細(xì)胞，則重組質(zhì)粒中應(yīng)含有抗藥物A基因作為標(biāo)記基因。