Question

【題目】白細胞介素是一類淋巴因子。研究人員將人白細胞介素的基因導入到酵母菌細胞中，使其分泌出有活性的白細胞介素。

（1）為增加白細胞介素基因的數(shù)量，可使用___________________技術，但前提是必須知道該基因的部分核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列_________________。

（2）為便于鑒別受體細胞中是否含有外源基因，攜帶外源基因的質(zhì)粒上應有___________，還應有____________________，以利于外源基因的表達。

（3）白細胞介素基因進入酵母菌細胞內(nèi)，并且在其細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程，稱為_________。在表達過程中，啟動子需與____________________識別和結合，從而驅動轉錄過程。

（4）為了能成功表達出白細胞介素，不使用細菌，而使用酵母菌細胞作為受體細胞，可能原因是__________________________________。

Answer 1

【答案】PCR 設計引物 標記基因 啟動子和終止子 轉化 RNA聚合酶 細菌細胞中無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等加工白細胞介素的細胞器

【解析】

分析題圖：圖示表示基因表達載體的構建過程，載體和目的基因都有限制酶EcoRⅠ與EcoR52的切割位點，所以切割載體和目的基因時用限制酶EcoRⅠ與EcoR52，再用DNA連接酶連接目的基因和運載體形成重組載體。基因表達載體含有目的基因、啟動子、終止子、標記基因等成分。

（1）基因工程中，擴增目的基因的方法為PCR技術，但前提是必須知道基因的已知序列，以便設計引物。

（2）基因表達載體含有目的基因、啟動子、終止子、標記基因等成分，標記基因的作用是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來。啟動子：是一段有特殊結構的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結合的部位，能驅動基因轉錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質(zhì)。終止子：也是一段有特殊結構的DNA片段，位于基因的尾端。因此啟動子和終止子可利于外源基因的表達。

（3）在重組載體導入酵母菌細胞之前，需用鈣離子處理酵母菌，使酵母菌稱為感受態(tài)細胞，白細胞介素基因進入酵母菌細胞內(nèi)，并且在其細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程，稱為轉化。在表達過程中，啟動子需與RNA聚合酶識別和結合，從而驅動轉錄過程。

（4）在體液免疫過程中，白細胞介素是由T淋巴細胞分泌的。由于細菌屬于原核生物，細胞中無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等加工白細胞介素的細胞器，因此為了能成功表達出白細胞介素，不使用細菌，而使用酵母細胞作為受體細胞。