Question

【題目】疫苗和抗體已被廣泛應(yīng)用于預(yù)防與診療傳染性疾病的過程，已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原。疫苗的生產(chǎn)和抗體的制備流程如下圖所示，請回答下列問題：

（1）③構(gòu)建A基因重組載體時，啟動子是重新構(gòu)建的，它應(yīng)該能被受體細(xì)胞的________所識別，以便于其催化轉(zhuǎn)錄過程。

（2）下圖為A基因的結(jié)構(gòu)示意圖，已知Ⅱ區(qū)的堿基數(shù)是2000個，其中陰影區(qū)域堿基數(shù)是800個，空白區(qū)域中G和C的總數(shù)共有400個，則由該區(qū)域轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的能指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成的mRNA中A和U的總數(shù)是_______個。

（3）在給小鼠皮下注射A蛋白質(zhì)時，要重復(fù)注射幾次的目的是通過二次免疫，增加小鼠體內(nèi)的_______數(shù)目。過程⑥的實質(zhì)為_______。

（4）在將X進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)前，至少需要經(jīng)過_______次篩選，其中包括_______和_______，擴(kuò)大培養(yǎng)的原理是_______。

（5）對健康人進(jìn)行該傳染病免疫預(yù)防時，可選用圖中基因工程生產(chǎn)的_______來制備疫苗。對該傳染病疑似患者確診時，可以從疑似患者體內(nèi)分離出病毒與已知病毒進(jìn)行核酸序列比較，或用圖中的_______與分離中的病毒進(jìn)行特異性檢測。

Answer 1

【答案】RNA聚合酶 400 漿細(xì)胞 基因的選擇性表達(dá) 2 篩選出雜交瘤細(xì)胞 篩選出產(chǎn)生特定（抗A蛋白）抗體的雜交瘤細(xì)胞 細(xì)胞增殖（有絲分裂） A蛋白 抗A蛋白的單克隆抗體

【解析】

分析題圖：圖示為疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一，其中①表示逆轉(zhuǎn)錄過程；②是獲取目的基因（A基因）的過程；③是基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；④是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過程；⑤是從小鼠皮下獲取已經(jīng)免疫的B細(xì)胞的過程；⑥表示B細(xì)胞的增殖分化形成漿細(xì)胞的過程；⑦是動物細(xì)胞融合過程；X為雜交瘤細(xì)胞。

（1）過程③構(gòu)建A基因重組載體時，啟動子要能被受體細(xì)胞的RNA聚合酶識別，以便于其催化轉(zhuǎn)錄過程。

（2）已知圖中Ⅱ區(qū)的堿基數(shù)是2000個，其中陰影區(qū)域堿基數(shù)是800個，則空白區(qū)域中堿基總數(shù)=2000-800=1200個，又已知空白區(qū)域中G和C的總數(shù)為400個，則A+T總數(shù)=1200-400=800個，因此每條鏈中A+T總數(shù)=800÷2=400個，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則，由該區(qū)轉(zhuǎn)錄形成的成熟mRNA中A和U總數(shù)也是400個。

（3）在給小鼠皮下注射A蛋白時，要重復(fù)注射幾次的目的是通過二次免疫，增加小鼠體內(nèi)的漿細(xì)胞數(shù)目；過程⑥表示B細(xì)胞的增殖和分化過程，其實質(zhì)為基因的選擇性表達(dá)。

（4）在將X進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)前，至少需要經(jīng)過2次篩選，第一次篩選是篩選出雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選是篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞；擴(kuò)大培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖（有絲分裂）。

（5）根據(jù)題意分析，對健康人進(jìn)行該傳染病免疫預(yù)防時，可選用圖中基因工程生產(chǎn)的A蛋白所制備的疫苗；對該傳染病疑似患者確診時，可以從疑似患者體內(nèi)分離出病毒，與已知病毒進(jìn)行核酸序列比較；也可以采用抗原-抗體雜交法，即用圖中的抗A蛋白的單克隆抗體與分離中的病毒進(jìn)行特異性結(jié)合檢測。