Question

【題目】已知新型冠狀肺炎（COVID-2019）的病原體為RNA病毒，被命名為SARS-CoV-2，該病毒表面的S蛋白為主要抗原。某生物科技小組設(shè)計了疫苗的生產(chǎn)和單克隆抗體的制備流程如圖所示。請回答下列問題：

（1）過程①代表的是___________，過程②所構(gòu)建S基因重組載體中，___________是重新構(gòu)建的，它們應(yīng)該能被受體細(xì)胞的RNA聚合酶所識別。

（2）在給小鼠皮下注射S蛋白時，要重復(fù)注射幾次，其目的是___________。

（3）在將X進(jìn)行擴大培養(yǎng)前，至少需要經(jīng)過2次篩選，第一次是將___________篩選出來，第二次是將___________篩選出來。

（4）對健康人進(jìn)行SARS-CoV-2免疫預(yù)防時，可以用滅活的SARS-CoV-2或圖中基因工程生產(chǎn)的_____來制備疫苗。對COVID-2019疑似患者確診時，可以從疑似患者體內(nèi)分離出病毒，與SARS-CoV-2進(jìn)行核酸序列比較，或與圖中的___________進(jìn)行特異性檢測。

Answer 1

【答案】逆轉(zhuǎn)錄 啟動子和終止子 通過二次免疫，增加小鼠體內(nèi)的漿細(xì)胞數(shù)目 雜交瘤細(xì)胞 能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞 S蛋白 抗S蛋白的單克隆抗體

【解析】

分析題圖可知，圖示為利用基因工程和動物細(xì)胞融合技術(shù)制備抗S蛋白單克隆抗體的流程，利用SARS-CoV-2病毒RNA經(jīng)過①過程逆轉(zhuǎn)錄得到病毒DNA，之后通過PCR技術(shù)擴增獲得大量S蛋白基因。②過程為基因表達(dá)載體的構(gòu)建，基因表達(dá)載體必須包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。

（1）由分析可知，過程①代表逆轉(zhuǎn)錄；過程②為基因表達(dá)載體的構(gòu)建，S基因重組載體中的啟動子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因首端，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄，終止子位于基因的尾端，也能被RNA聚合酶識別，使轉(zhuǎn)錄在需要的地方停止。

（2）在給小鼠皮下注射S蛋白時，要重復(fù)注射幾次，其目的是通過二次免疫，增加小鼠體內(nèi)的漿細(xì)胞數(shù)目，以利于之后的提取與細(xì)胞融合。

（3）分析圖示過程可知，X為能產(chǎn)生抗S蛋白單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，在將X進(jìn)行擴大培養(yǎng)前，至少需要經(jīng)過2次篩選，第一次是將雜交瘤細(xì)胞篩選出來，第二次是將能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞篩選出來。

（4）對健康人進(jìn)行SARS-CoV-2免疫預(yù)防時，可以用滅活的SARS-CoV-2病毒或圖中基因工程生產(chǎn)的S蛋白來制備疫苗，因為蛋白質(zhì)不具侵染性，不會破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)。對COVID-2019疑似患者確診時，可以從疑似患者體內(nèi)分離出病毒，與SARS-CoV-2進(jìn)行核酸序列比較，或與圖中的抗S蛋白的單克隆抗體進(jìn)行抗原—抗體特異性檢測，若產(chǎn)生雜交帶，說明有病毒存在。