Question

【題目】下圖是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應器的技術路線。圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因，ampR表示氨芐青霉索抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直線所示為三種限制酶的酶切位點。據(jù)圖回答：

（1）圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用 限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因。篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含 的培養(yǎng)基上進行。能驅動人乳鐵蛋白基因的乳腺細胞中特異性表達的調控因子是圖中的 。過程①采用的操作方法通常是 。

（2）過程②采用的生物技術是_______。對早期胚胎進行切割，經(jīng)過程②可獲得多個新個體。目前最常見的是經(jīng)分割產(chǎn)生的同卵 胎。

（3）為檢測人乳鐵蛋白基因是否成功表達，可采用 技術。

（4）對代孕牛的要求是 。

Answer 1

【答案】

（1）HindⅢ和BamHⅠ 氨芐青霉 啟動子 顯微注射法。

（2）胚胎移植 雙（1分）

（3）抗原—抗體雜交

（4）有健康體質和正常繁殖能力

【解析】

試題分析：

（1）圖中信息顯示：人乳鐵蛋白基因的兩端和載體上都有BamHⅠ和HindⅢ的酶切位點，因此將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用HindⅢ和BamHⅠ限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因。因人乳鐵蛋白基因的插入，使得重組載體中的四環(huán)素抗性基因（tetR）遭到破壞，但氨芐青霉索抗性基因（ampR）結構完好，因此篩選含有重組載體的大腸桿菌，首先需要在含氨芐青霉的培養(yǎng)基上進行。啟動子位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結合的部位，驅動基因轉錄出mRNA，據(jù)此可知：能驅動人乳鐵蛋白基因的乳腺細胞中特異性表達的調控因子是圖中的啟動子。過程①是將重組載體導入供體牛的受精卵中，采用的操作方法通常是顯微注射法。

（2）過程②是將早期胚胎移入受體，采用的生物技術是胚胎移植。采用胚胎分割技術對早期胚胎進行切割從而獲得新個體，目前最常見的是經(jīng)分割產(chǎn)生的同卵雙胎。

（3）人乳鐵蛋白基因是目的基因，檢測目的基因是否成功表達，可采用抗原—抗體雜交技術。 （4）在胚胎移植時，對受體（代孕牛）的要求是有健康的體質和正常繁殖能力。