Question

【題目】科研人員將對(duì)絨毛生長(zhǎng)有促進(jìn)作用的胰島素樣生長(zhǎng)因子基因(IGF-1G)導(dǎo)入山羊成纖維細(xì)胞內(nèi)，再進(jìn)行體細(xì)胞克隆獲得轉(zhuǎn)基因克隆絨山羊，其操作流程如下圖所示。請(qǐng)回答下列問題：

(1)過程甲在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，必須使用的工具酶是___________�；�因表達(dá)載體上有RNA聚合酶的識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn)，可驅(qū)動(dòng)IGF-1G轉(zhuǎn)錄，該部位被稱為___________。

(2)過程乙在核移植構(gòu)建重組細(xì)胞時(shí)，需要先除去___________的核，目的是____________________________________________。

(3)培養(yǎng)重組細(xì)胞的過程中，向培養(yǎng)液中通入一定濃度CO2的目的是___________________。

(4)過程丁通常將發(fā)育至___________期的早期胚胎移入代孕母羊的子宮內(nèi)發(fā)育。利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因個(gè)體，這體現(xiàn)了早期胚胎細(xì)胞的___________。

Answer 1

【答案】限制酶和DNA連接酶 啟動(dòng)子 卵母細(xì)胞 保證核遺傳物質(zhì)來自含IGF-IG（或目的基因、轉(zhuǎn)胰島素樣生長(zhǎng)因子基因）的成纖維細(xì)胞 維持培養(yǎng)液pH的穩(wěn)定（或維持培養(yǎng)液的pH） 桑椹胚或囊胚 全能性

【解析】

本題以“培育轉(zhuǎn)基因克隆絨山羊”的操作流程圖為情境，考查學(xué)生對(duì)基因工程的基本操作程序、核移植技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植等相關(guān)知識(shí)的識(shí)記和理解能力。

(1) 在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需使用限制酶切割含有目的基因（IGF-1G）的DNA片段和載體，再用DNA連接酶將切割后所獲得的目的基因和載體連接起來形成重組DNA分子，即必須使用的工具酶是限制酶和DNA連接酶。基因表達(dá)載體上的啟動(dòng)子位于基因的首端，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn)，可驅(qū)動(dòng)IGF-1G轉(zhuǎn)錄出mRNA。

(2) 為了保證核遺傳物質(zhì)來自含IGF-IG的成纖維細(xì)胞，在核移植構(gòu)建重組細(xì)胞時(shí)，需要先除去卵母細(xì)胞的細(xì)胞核。

(3) 培養(yǎng)重組細(xì)胞需借助動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，在此過程中，向培養(yǎng)液中通入一定濃度CO2的目的是維持培養(yǎng)液的pH。

(4) 過程丁表示胚胎移植。在進(jìn)行胚胎移植時(shí)，通常選擇發(fā)育至桑椹胚或囊胚期的早期胚胎。利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因個(gè)體，這說明早期胚胎細(xì)胞具有全能性。