Question

【題目】下圖1是利用兩種不同生物技術(shù)將小鼠培育成大鼠的過程。圖2中質(zhì)粒是基因工程中常用的質(zhì)粒pIJ702，其中tsr為硫鏈絲菌素抗性基因，mel是黑色素合成基因，其表達(dá)能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落；而限制酶Cla Ⅰ、Bgl Ⅱ、Pst I、Sac Ⅰ、Sph Ⅰ在pⅠJ702 上分別只有一處識(shí)別序列。

（1）圖1中應(yīng)用到的生物工程技術(shù)有_______________。c分子稱為____________，其上的生長(zhǎng)激素基因表達(dá)產(chǎn)物的受體分布在丁鼠的全身細(xì)胞的______________。

（2）若大鼠甲和大鼠乙體內(nèi)X染色體上均帶有某種致病基因，則培育出的大鼠丙和大鼠丁攜帶致病基因的是（不考慮基因突變）______________。

（3）以Sac Ⅰ和Sph Ⅰ同時(shí)切割大鼠生長(zhǎng)激素基因和質(zhì)粒PIJ702，獲取的目的基因去置換PIJ702上0.4kb的片段，構(gòu)成重組質(zhì)粒pZHZ8。上述兩種質(zhì)粒的限制酶酶切片段長(zhǎng)度列在表1中。由此判斷目的基因的片段長(zhǎng)度為_____________kb。參照表1數(shù)據(jù)，如果用Pst Ⅰ和Cla l同時(shí)酶切重組質(zhì)粒pZHZ8，則兩種酶可將pZHZ8切成__________個(gè)片段。

（4）重組質(zhì)粒pZHZ8上的標(biāo)記基因是__________________，在含硫鏈絲菌素固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)后，篩選過程中要淘汰__________色的菌落。

Answer 1

【答案】 核移植技術(shù)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)、胚胎移植技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù) 基因表達(dá)載體（重組DNA分子或重組質(zhì)粒） 細(xì)胞膜上 大鼠丙攜帶，丁不攜帶 1.4 4 tsr基因（硫鏈絲菌素抗性基因） 黑

【解析】試題分析：本題主要考查基因工程、細(xì)胞工程，考查對(duì)核移植技術(shù)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)流程的理解和識(shí)記。解答此類題目應(yīng)仔細(xì)觀察各種限制酶在供體DNA和質(zhì)粒上的酶切位點(diǎn)，判斷目的基因的插入位置和標(biāo)記基因是否被破壞。

（1）圖1中技術(shù)Ⅰ為核移植技術(shù)，技術(shù)Ⅱ為轉(zhuǎn)基因技術(shù)，應(yīng)用到的生物工程技術(shù)有核移植技術(shù)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)、胚胎移植技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。c分子稱為基因表達(dá)載體（重組DNA分子或重組質(zhì)粒），生長(zhǎng)激素通過和細(xì)胞膜表面的受體結(jié)合調(diào)節(jié)細(xì)胞代謝。

（2）大鼠甲X染色體上帶有的某種致病基因會(huì)隨細(xì)胞核傳給大鼠丙，大鼠乙只為大鼠丁提供生長(zhǎng)激素基因，丁不攜帶乙X染色體上攜帶的致病基因。

（3）以Sac Ⅰ和Sph Ⅰ同時(shí)切割大鼠生長(zhǎng)激素基因和質(zhì)粒PIJ702，獲取的目的基因去置換PIJ702上0.4kb的片段，構(gòu)成重組質(zhì)粒pZHZ8。據(jù)表可知重組質(zhì)粒pZHZ8比原質(zhì)粒增加1.0kb，說明目的基因的片段長(zhǎng)度為0.4+1.0=1.4kb。據(jù)表1可知， Pst Ⅰ和Cla l在重組質(zhì)粒pZHZ8上均具有兩個(gè)酶切位點(diǎn)，則兩種酶同時(shí)酶切重組質(zhì)粒pZHZ，可將pZHZ8切成4個(gè)片段。

（4）黑色素合成基因mel會(huì)被破壞，重組質(zhì)粒pZHZ8上的標(biāo)記基因是tsr基因（硫鏈絲菌素抗性基因），在含硫鏈絲菌素固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)后，篩選過程中要淘汰黑色的菌落。