Question

【題目】資料顯示，中國每年約有13萬新增宮頸癌病例，占全球新發(fā)病例的三分之一，其中約有8萬女性去世。宮頸癌也是中國15歲至44歲女性中的第二大高發(fā)癌癥。人乳頭狀瘤病毒(HPV)與宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)，抗HPV的單克隆抗體可以準確檢測出HPV，從而及時監(jiān)控宮頸癌的發(fā)生，以下是以HPV衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體的過程，請據(jù)圖回答下列問題：

(1)單克隆抗體制備過程中涉及的細胞工程技術(shù)有_________________________。

(2)對于抗體檢測呈陽性的雜交瘤細胞應盡早進行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀釋法，即稀釋細胞到3～10個/ mL，每孔加入細胞稀釋液_____ mL，使每個孔內(nèi)細胞一般不多于一個，達到單克隆培養(yǎng)的目的。

(3)由上述過程生產(chǎn)出的單克隆抗體一般不能直接用于人體，理由是____________________。

(4)科學家從某些無限增殖細胞的細胞質(zhì)中分離出了無限增殖調(diào)控基因(prG)，該基因能激發(fā)動物細胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更多的思路。除本題描述的制備單克隆抗體技術(shù)外，請再簡要寫出一種制備單克隆抗體的思路。_______________________________________。

(5)利用蛋白質(zhì)工程技術(shù)對抗HPV抗體進行改造以延長其體外保存的時間，其基本途徑是從_________________出發(fā)，設(shè)計_________________，進一步推測應有的氨基酸序列，進而確定對應的脫氧核苷酸序列，據(jù)此獲得相應基因。

Answer 1

【答案】動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合 0.1 小鼠形成的抗體對人體來說是抗原，存在著排異反應 通過基因工程向漿細胞中導入prG；(或：利用核移植技術(shù)將漿細胞的細胞核移植到去核的無限增殖細胞中) 預期蛋白質(zhì)（抗HPV抗體）的功能 蛋白質(zhì)（抗HPV抗體）的結(jié)構(gòu)

【解析】

動物細胞融合指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程，融合后形成的具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞，稱為雜種細胞。

單克隆抗體制備過程中的兩次篩選：第一次用選擇培養(yǎng)基篩選得到雜交瘤細胞；第二次用專一抗體檢測得到能分泌特定抗體的雜交瘤細胞。

（1）單克隆抗體制備過程中需要經(jīng)過瘤細胞和漿細胞的融合及雜交瘤細胞的培養(yǎng)，故需要經(jīng)過動物細胞培養(yǎng)和動物細胞的融合。

（2）對于抗體檢測呈陽性的雜交瘤細胞應盡早進行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀釋法，即稀釋細胞到3～10個/ mL，即每孔加入細胞稀釋液0.1mL，使每個孔內(nèi)細胞一般不多于一個，達到單克隆培養(yǎng)的目的。

（3）由于來自于小鼠的抗體對人體來說是抗原，存在著排異反應，故一般不能直接用于人體。

（4）科學家從某些無限增殖細胞的細胞質(zhì)中分離出了無限增殖調(diào)控基因(prG)，可以通過基因工程向漿細胞中導入prG，獲得能無限增殖又可以產(chǎn)生特定抗體的漿細胞。

（5）蛋白質(zhì)工程的基本途徑：是從預期蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，進一步推測應有的氨基酸序列，進而確定對應的脫氧核苷酸序列，據(jù)此獲得相應基因。