Question

【題目】一種廣泛使用的除草劑（含氮有機(jī)物）在土壤中不易被降解，長(zhǎng)期使用可污染土壤。為修復(fù)被該除草劑污染的土壤，可按下面程序選育能降解該除草劑的細(xì)菌（已知該除草劑在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明）。

（1）制備土壤浸出液時(shí)，為避免菌體濃度過高，需將浸出液進(jìn)行稀釋處理�，F(xiàn)有一升土壤浸出液，用無菌吸管吸取1 mL液樣至盛有9 mL無菌水的試管中，依次稀釋103稀釋度。各取0．1 mL已稀釋103倍的水樣分別涂布到三個(gè)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，記錄的菌落數(shù)分別為55、56、57，則每升原土壤浸出液樣中菌體數(shù)為_____ 。

（2）要從長(zhǎng)期使用該除草劑的土壤中分離目的菌，從用途方面來看，上述培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基的特點(diǎn)是_____ 。

（3）接種技術(shù)的核心是_____ 。培養(yǎng)時(shí)，只有很少菌落出現(xiàn)，大部分細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)的主要原因是_____ 或有氧條件抑制了這些細(xì)菌的生長(zhǎng)。

（4）在培養(yǎng)基上形成的菌落中，無透明圈菌落利用的氮源主要是_____ ，有透明圈菌落利用的氮源主要是_____ ，據(jù)此可篩選出目的菌。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖顯示的A～E五種菌株中，_____ 是最理想菌株。

可將選取的所需菌種利用_____ 的方法長(zhǎng)期保存。

Answer 1

【答案】5．6×108 在無氮固體培養(yǎng)基中添加了該除草劑 防止雜菌污染，保證培養(yǎng)物的純度 培養(yǎng)基中缺少這些細(xì)菌可利用的氮源 氮?dú)?/span> 該除草劑 E 甘油管藏

【解析】

1.選擇培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的不需要的微生物的生長(zhǎng)，促進(jìn)所需要的微生物生長(zhǎng)，本題這種根據(jù)流程圖看，“無氮培養(yǎng)基+高濃度的除草劑”，說明A、B、C培養(yǎng)基中是以除草劑為唯一氮源。

2.每克樣品中的菌落數(shù)=（C÷V）×M，其中C代表某一稀釋度下的平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（mL）M代表稀釋的倍數(shù)。

（1）圖中稀釋的倍數(shù)是103，三個(gè)菌落的平均數(shù)=（55+56+57）÷3=56，則每毫升樣品中菌株數(shù)=56÷0.1×103=5.6×105個(gè)，所以每升土壤浸出液中的菌株數(shù)=5.6×105×103=5.6×108個(gè)。

（2）該除草劑為含氮有機(jī)物，為了選育能降解該除草劑的細(xì)菌，應(yīng)采用唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，即無氮的固體培養(yǎng)基中添加該除草劑。

（3）接種技術(shù)的核心是無菌操作，防止雜菌污染，保證培養(yǎng)物的純度。培養(yǎng)時(shí)，只有很少菌落出現(xiàn)，大部分細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)，原因是培養(yǎng)基缺少這些細(xì)菌可利用的氮源或有氧條件抑制了這些細(xì)菌的生長(zhǎng)。

（4）由于該除草劑的培養(yǎng)基不透明，被菌落分解后可產(chǎn)生透明帶，無透明帶說明除草劑未被分解，菌落利用的氮源就只能是空氣中的氮?dú)饬�；而出現(xiàn)透明帶說明除草劑被分解，菌落是分解該除草劑的細(xì)菌，氮源是該除草劑；E透明圈最大，故是最理想菌株。選取的所需菌種可利用甘油管藏的方法長(zhǎng)期保存。