【題目】在基因工程的操作過程中，有多種方法可檢測目的基因是否導入受體菌�；卮鹣铝袉栴}：

（1）PCR檢測法：根據(jù)一段已知目的基因的核苷酸序列設(shè)計______________，對受體菌DNA進行擴增，經(jīng)過解鏈、______________、延伸三個步驟的循環(huán)，檢測PCR產(chǎn)物的長度是否與目的基因一致。

（2）熒光蛋白基因篩選法：某種熒光蛋白（GFP）在紫外線照射下會發(fā)出綠色熒光。用_____________酶將目的基因和GFP基因拼接成融合基因，并與____________重組后導入受體菌，經(jīng)培養(yǎng)篩選能發(fā)出綠色熒光的菌落。

（3）環(huán)絲氨酸輔助篩選法：四環(huán)素能使細菌停止生長但不致死；環(huán)絲氨酸能使正常生長的細菌致死，而對停止生長的細菌不致死。某質(zhì)粒如圖所示（Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Tetr表示四環(huán)素抗性基因），Tetr中插入目的基因后失活。用此質(zhì)粒構(gòu)建表達載體，轉(zhuǎn)化細菌后，結(jié)果有3種：未轉(zhuǎn)化的細菌、含質(zhì)粒的細菌、含重組質(zhì)粒的細菌。

①用含有__________和____________的培養(yǎng)基對上述3種細菌進行篩選，只有含質(zhì)粒的細菌被淘汰，理由是______________；

②在上述篩選的基礎(chǔ)上，若要篩選出含重組質(zhì)粒的細菌，還需使用含有的______________培養(yǎng)基。

【答案】引物 復(fù)性（退火） DNA連接 運載體 四環(huán)素 環(huán)絲氨酸 含質(zhì)粒的細菌有Tetr，四環(huán)素對其不起作用，環(huán)絲氨酸使其致死 氨芐青霉素

【解析】

PCR原理：在解旋酶作用下，打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的，DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈，PCR反應(yīng)過程是：變性→復(fù)性→延伸�；蚬こ滩僮髦幸玫较拗泼浮�DNA連接酶、載體，限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，DNA連接酶用于連接目的基因和載體；根據(jù)質(zhì)粒圖顯示，質(zhì)粒中含有Ampr和Tetr，目的基因的插入位點位于Tetr中，轉(zhuǎn)化細菌后有3種結(jié)果：未轉(zhuǎn)化的細菌、含質(zhì)粒的細菌、含重組質(zhì)粒的細菌，其中未轉(zhuǎn)化的細菌在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上停止生長，含質(zhì)粒的細菌在四環(huán)素和氨芐青霉素培養(yǎng)基上能生長，含重組質(zhì)粒的細菌在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上停止生長，但在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能生長。

（1）PCR全稱為聚合酶鏈式反應(yīng)，是一項在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù)，前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物；對受體菌DNA進行擴增，經(jīng)過解鏈、復(fù)性、延伸三個步驟的循環(huán)，檢測PCR產(chǎn)物的長度是否與目的基因一致。

（2）熒光蛋白基因篩選法：某種熒光蛋白（GFP）在紫外線照射下會發(fā)出綠色熒光。用DNA連接酶將目的基因和GFP基因拼接成融合基因，并與運載體重組后導入受體菌，經(jīng)培養(yǎng)篩選能發(fā)出綠色熒光的菌落。

（3）①用含有四環(huán)素和環(huán)絲氨酸的培養(yǎng)基對上述3種細菌進行篩選，只有含質(zhì)粒的細菌被淘汰，原因是含質(zhì)粒的細菌有Tetr，四環(huán)素對其不起作用，能正常生長，而環(huán)絲氨酸能使其致死。

②四環(huán)素能使細菌停止生長但不致死，環(huán)絲氨酸能使正常生長的細菌致死，而對停止生長的細菌不致死，先在含有四環(huán)素和環(huán)絲氨酸的培養(yǎng)基上篩選出未轉(zhuǎn)化的細菌和含重組質(zhì)粒的細菌，未轉(zhuǎn)化的細菌在含四環(huán)素培養(yǎng)基上停止生長，環(huán)絲氨酸不使其致死，含重組質(zhì)粒的細菌由于四環(huán)素抗性基因被破壞，故在含四環(huán)素培養(yǎng)基上停止生長，而環(huán)絲氨酸對其不致死，重組質(zhì)粒在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能生長，若要篩選出含重組質(zhì)粒的細菌，還需使用含有的氨芐青霉素培養(yǎng)基。

練習冊系列答案
相關(guān)習題

科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】若圖1、圖2、圖3是某同學做有絲分裂實驗時，在光學顯微鏡下觀察到的圖像，下列有關(guān)說法正確的是

A.圖1是在低倍顯微鏡下所觀察到的植物根尖分生區(qū)細胞圖像

B.圖3是根尖經(jīng)過解離、漂洗、染色、制片后，在高倍鏡下所觀察到的圖像

C.圖1轉(zhuǎn)為圖2的操作步驟是移動裝片→轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器→調(diào)節(jié)視野亮度→轉(zhuǎn)動粗準焦螺旋

D.制作裝片的過程中解離液的目的是使細胞分散開，有利于觀察

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】如圖兩條曲線代表A、B兩種生物種群數(shù)量Nt（橫坐標）和一年后的種群數(shù)量Nt+1(縱坐標)之間的關(guān)系。直線P表示Nt= Nt+1。其中A生物種群的動態(tài)曲線有兩個平衡點即穩(wěn)定平衡點（S點）和絕滅點（X點），當種群數(shù)量高于X時種群可以回升到S，但是種群數(shù)量一旦低于X就會走向絕滅。B生物種群的動態(tài)曲線只有一個穩(wěn)定平衡點而沒有絕滅點。下列錯誤的是（ ）

A.當A.生物的種群數(shù)量高于X點時，無論高于或低于S點，都會去向該平衡點

B.當種群基數(shù)較少時，種群會在短時間內(nèi)快速增長的是B生物

C.家鼠全年均繁殖，種群的動態(tài)曲線與A生物相同

D.東北虎等珍稀瀕危動物，其數(shù)量一旦低于X點，就會走向滅絕

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】如圖是生物圈中碳循環(huán)示意圖，下列相關(guān)分析正確的是（ ）

A.生物圈通過碳循環(huán)實現(xiàn)碳元素的自給自足

B.A是消費者， C是生產(chǎn)者，各成分間以CO2的形式傳遞碳元素

C. 對E過度開發(fā)利用會打破生物圈中碳平衡

D.a過程消耗的能量和b、c兩過程產(chǎn)生的能量值和基本持平

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】請閱讀材料，回答下列問題。

（I）（1）圖A所示為桑基魚塘農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)局部的能量流動，圖中字母代表相應(yīng)能量。

圖A

①C和B1+C1+D1可分別表示桑樹和蠶用于______________________的能量。

②蠶同化的能量D=_____________（填字母）。正常情況下D/C的比值_____（填“大于”、“小于”或“等于”）10%。將蠶沙（糞便）投入魚塘供給魚食用。

③研究生態(tài)系統(tǒng)的能量流動，還可以幫助人們實現(xiàn)對能量的多級利用，從而大大提高____________，幫助人們合理地調(diào)整生態(tài)系統(tǒng)中的能量流動關(guān)系，使能量___________。

（2）某位生態(tài)學對某水生生態(tài)系統(tǒng)的營養(yǎng)結(jié)構(gòu)調(diào)查后，得到了如圖B所示的食物網(wǎng)。

圖B

若太陽魚只捕食浮游動物和雙翅目幼蟲（能量傳遞效率為10%），且捕食的雙翅目昆蟲和浮游動物比例由4：1或1：4，則太陽魚的數(shù)量將________（填“增多”或“減少”），太陽魚的數(shù)量是原來的_____________（用分數(shù)表示即可）。

（II）某果園發(fā)生了蟲害，該蟲害是由害蟲A引起的。害蟲招來了一種小蜂和一種小鳥，小蜂把卵產(chǎn)入害蟲A.體內(nèi)，孵出的小蜂幼蟲吃空蟲體后羽化飛出，再攻擊害蟲A的其他個體。小鳥特別喜食害蟲A。也捕食小蜂。在體內(nèi)有小蜂幼蟲的害蟲A中，有些個體常瘋狂地搖擺身體，因而容易被小鳥發(fā)現(xiàn)而被捕食。

（3）小鳥和小蜂的種間關(guān)系是________________________。

（4）小鳥捕食瘋狂搖擺的害蟲A，對A種群的生存___________（填“有利”、“不利”或“無影響”），理由是_______________________。

（III）小球藻（一種單細胞綠藻）是產(chǎn)生生物柴油的原料之一。研究發(fā)現(xiàn)有些細菌能產(chǎn)生促進小球藻生長的物質(zhì)，也能分解小球藻產(chǎn)生的自身抑制物。研究人員利用小球藻培養(yǎng)液中分離純化的3種細菌（X1、X2、X3）分別與小球藻混合培養(yǎng)，以篩選出對小球藻生長，油脂積累有利的共生菌。圖1、2表示有關(guān)實驗結(jié)果，其中A1-A3代表等量小球藻分別與細菌X1-X3的混合培養(yǎng)組。

（5）在對小球藻進行直接計數(shù)時，通常采用抽樣檢測的方法。計數(shù)時取小球藻培養(yǎng)液并稀釋400倍后，用血細胞計數(shù)板（計數(shù)室中方格面積：1/25mm2，計數(shù)室深度為0.1mm）進行計數(shù)，得到平均每個中方格中小球藻數(shù)量為25個。已知每個小球藻細胞干重約10-12g，則每升樣品液中小球藻干重為_______g。

（6）根據(jù)實驗結(jié)果，應(yīng)選擇________作為最佳共生菌。在利用這種菌種進行連續(xù)生產(chǎn)時，某同學認為藻密度應(yīng)控制在培養(yǎng)至第6天時對應(yīng)的藻密度，你是否同意他的觀點？請簡要說明理由_____________________。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】稗草為稻田中常見的惡性雜草，在其生長過程中會產(chǎn)生某些稱為化感物質(zhì)（DIMBOA）的代謝產(chǎn)物，抑制水稻的生長，最終導致水稻減產(chǎn)。請回答問題：

（1）從生態(tài)系統(tǒng)的成分分析，水稻和稗草屬于該生態(tài)系統(tǒng)中______，二者種間關(guān)系屬于______。

（2）為研究DIMBOA影響水稻生長的機制，科研人員進行下述實驗。

實驗一：將數(shù)量相同、長勢相近的稗草與水稻種子均分為兩組：A組將水稻與稗草種子混合培養(yǎng)；B組單獨培養(yǎng)稗草種子。待長出第一片葉子后，將A、B兩組分別轉(zhuǎn)入去離子水中，均培養(yǎng)45min，1.5h和3h，分別測定兩組培養(yǎng)液中的DIMBOA含量，結(jié)果如圖1所示：

DIMBOA在______組中的含量較高，推測______誘導DIMBOA基因表達，致使化感物質(zhì)的含量明顯升高。

（3）實驗二：將不同濃度該物質(zhì)溶于培養(yǎng)水稻的水溶液中，一周后，對水稻的高度和鮮重進行測量。

根據(jù)圖2實驗結(jié)果顯示：隨DIMBOA濃度升高，株高和鮮重______。初步推測稗草抑制水稻生長的生理機制：DIMBOA主要是通過抑制______過程，導致有機物積累減少，從而抑制了水稻的生長和鮮重的增加，且DIMBOA對水稻的化感作用與其濃度呈______。

（4）綜合上述研究，提出兩條可使水稻增產(chǎn)的思路：______

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】在對某自然保護區(qū)內(nèi)甲、乙兩個不同物種的種群數(shù)最進行了調(diào)查之后，又開展了連續(xù)4年的跟蹤調(diào)查，計算其L值（L=當年末種群個體數(shù)量/前一年來種群個體數(shù)量），結(jié)果如圖所示。下列關(guān)于這4年調(diào)查期間的種群致最變化的敘述，錯誤的是

A. 第1年末甲乙兩種群的增長速度不一定相等

B. 第2年來乙種群數(shù)最不一定大于甲

C. 第3年來乙種群數(shù)量達到了最大值

D. 這4年中甲種群每年增加的數(shù)量是相等的

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】使用催腐劑(含腐生細菌、真菌)有助于解決由焚燒秸稈、稻草等帶來的環(huán)境污染、土地 肥力下降等問題。為探究催腐劑對植物落葉的分解作用，某研究小組將帶有落葉的表層土 壤均分為甲、乙、丙三組，其中甲組不作處理，澆上等量的蒸餾水，放在無菌且其他條件 適宜環(huán)境中，每隔一段時間測定未腐爛的落葉量，結(jié)果如圖所示。下列相關(guān)分析合理的是

A.乙組是對帶有落葉的表層土壤進行了滅菌處理

B.甲組中參與落葉中有機物分解的生物都是細菌或真菌

C.丙組是一段時間后在滅菌的帶有落葉的表層土壤中加入了催腐劑

D.催腐劑降解秸稈產(chǎn)生的無機離子和 CO2 通過根系被植物吸收

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】科學研究表明，胰液分泌受神經(jīng)和體液的雙重調(diào)節(jié)，以體液調(diào)節(jié)為主。下圖中，圖1為胰腺分泌活動的調(diào)節(jié)示意圖；圖2是圖1的局部放大圖，1～5代表特定的結(jié)構(gòu)或物質(zhì)； 圖3是胰島的示意圖；圖4是圖3的局部放大圖，6～9代表不同的液體。請據(jù)圖回答問題：

（1）當食物進入胃后，擴張胃體，通過反射，作用于胰腺，直接刺激胰腺的外分泌部分泌胰液，該反射為非條件反射，效應(yīng)器是_______________________。 當神經(jīng)沖動傳導到圖2中的突觸小體時，引發(fā)突觸小泡與突觸前膜融合，釋放神經(jīng)遞質(zhì)，神經(jīng)遞質(zhì)不是以跨膜方式釋放，而是以胞吐的方式釋放，其意義是 ________________________。

（2）圖3中胰島A細胞和胰島B細胞分泌的激素能有效地調(diào)節(jié)血糖濃度，若圖4中血液的流動方向為10→8，則在飯后5小時，8處的_______________（激素）濃度大于10處。

（3）隨著人們不良飲食等生活習慣的形成，多種“文明病”相繼產(chǎn)生，糖尿病就是典型代表。糖尿病有多種類型，其中，Ⅰ型糖尿病人體內(nèi)胰島素偏低，Ⅱ型糖尿病人體內(nèi)胰島素水平正�；蚱�。推測Ⅱ 型糖尿病的直接原因最可能是________________________________。

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