Question

【題目】請(qǐng)根據(jù)血紅蛋白的提取和分離流程圖回答下列問(wèn)題：

（1）將實(shí)驗(yàn)流程按先后順序補(bǔ)充完整：_______________、_______________。

（2）凝膠色譜法的基本原理是根據(jù)_______________________分離蛋白質(zhì)。

（3）洗滌紅細(xì)胞的目的是去除______________,洗滌干凈的標(biāo)志是_____________________。為防止血液凝固，在采血容器中通常要預(yù)先加入____________（抗凝劑）。

（4）下圖是凝膠色譜法分離血紅蛋白時(shí)樣品加入過(guò)程的示意圖,正確的加樣順序是________。

（5）在裝填色譜柱時(shí)不能有氣泡存在，因?yàn)?/span>_________________________________________，降低分離效果。如果______________________________，說(shuō)明色譜柱制作成功。

Answer 1

【答案】血紅蛋白的釋放 凝膠色譜柱的裝填 相對(duì)分子質(zhì)量的大小 雜蛋白（或血漿蛋白） 離心后的上清液不再呈現(xiàn)黃色 檸檬酸鈉 ④①②③ 氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序 紅色區(qū)帶均勻一致地移動(dòng)

【解析】

本題以圖文結(jié)合為情境，考查學(xué)生對(duì)血紅蛋白的提取和分離的相關(guān)知識(shí)的識(shí)記和理解能力，以及識(shí)圖分析能力。

(1) 血紅蛋白的提取和分離流程為：紅細(xì)胞的洗滌→血紅蛋白的釋放→分離血紅蛋白溶液→透析→凝膠色譜柱的制作→凝膠色譜柱的裝填→樣品的加入和洗脫�？梢�(jiàn)，A表示血紅蛋白的釋放，B表示凝膠色譜柱的裝填。

(2) 凝膠色譜法的基本原理是：根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)。

(3) 洗滌紅細(xì)胞的目的是去除雜蛋白，以利于后續(xù)步驟的分離純化。洗滌干凈的標(biāo)志是離心后的上清液不再呈現(xiàn)黃色。為防止血液凝固，在采血容器中要預(yù)先加入抗凝血?jiǎng)�檸檬酸鈉，其比例是每100 mL血液加入3.0 g檸檬酸鈉。

(4) 加樣順序是調(diào)整緩沖液面、滴加透析樣品、樣品滲入凝膠床、再調(diào)整緩沖液面，即④①②③。

(5) 由于氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果，所以在裝填凝膠色譜柱時(shí)，不得有氣泡產(chǎn)生。在蛋白質(zhì)分離過(guò)程中，如果紅色區(qū)帶均勻一致地移動(dòng)，說(shuō)明色譜柱制作成功。