Question

【題目】高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選了高效產生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如下圖所示。請回答下列問題：

(1)實驗過程應采用無菌技術，防止培養(yǎng)物被微生物污染及 被微生物感染，操作者的雙手需要進行清潔和 處理。

(2)Ⅰ、Ⅱ號培養(yǎng)基配制和滅菌時，滅菌與調節(jié)pH的先后順序是 。

(3)Ⅰ號培養(yǎng)基中的碳源為 。若Ⅰ號培養(yǎng)基中的菌落連成一片，最可能的原因是 。

(4)部分嗜熱菌的菌落周圍形成透明圈，應挑出透明圈 (填“大”或“小”)的菌落接種到Ⅱ號培養(yǎng)基，該過程的目的是 目的菌；下次劃線時接種環(huán)上的菌種來源于 。

Answer 1

【答案】(1)操作者自身 消毒 (2)先調節(jié)pH，后滅菌 (3)淀粉 菌液濃度過高(或稀釋不夠) (4)大 純化 上次劃線末端

【解析】（1）整個實驗過程應采用無菌技術，防止培養(yǎng)物被微生物污染及操作者自身被微生物感染，實驗前后操作者的雙手需要進行清潔和消毒處理。（2）培養(yǎng)基制作完成后要調整pH，再滅菌。（3）Ⅰ號培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，該篩選要使用以淀粉為唯一的碳源的選擇培養(yǎng)基。用稀釋涂布平板法接種前需要對菌液進行梯度稀釋，如果培養(yǎng)基中的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃度過高（或稀釋不夠）。（4）嗜熱菌的菌落周圍形成透明圈越大，說明嗜熱菌產生高溫淀粉酶的效率越高，應該就是篩選的目的微生物，將其菌落接種到Ⅱ號培養(yǎng)基，該過程的目的是純化目的菌，接種時下次劃線時接種環(huán)上的菌種來源于上次劃線的末端。