Question

【題目】利用單克隆抗體特異的作用于埃博拉病毒侵染蛋白（VP40蛋白）是一種戰(zhàn)勝埃博拉病毒的有效途徑。請據圖回答：

（1）過程①中選用兩種限制酶切割，使目的基因的兩端產生不同的黏性末端，這樣處理的目的是___________。

（2）圖中過程②需要用___________處理大腸桿菌，原因是_____________________。

（3）在基因表達載體中，VP40蛋白基因的首端必須含有___________，其作用是能夠被___________識別和結合，從而保證③順利完成。

（4）為檢測VP40基因是否成功表達，可以采用___________技術。VP40蛋白抗體能夠戰(zhàn)勝埃博拉病毒的原因是______________________。

Answer 1

【答案】 防止目的基因與質粒錯誤連接（或防止目的基因環(huán)化） Ca2+ （CaCl2）處理過的大腸桿菌易于吸收質粒（外源DNA）（或處于感受態(tài)） 啟動子 RNA聚合酶 抗原-抗體雜交 VP40蛋白抗體與VP40蛋白結合，阻止了埃博拉病侵染細胞

【解析】試題分析：本題考查基因工程、細胞工程，考查對基因工程操作程序、單克隆抗體特點的理解。解答此題，可根據同種限制酶產生的黏性末端可以連接分析用兩種限制酶切割目的基因的原因，根據“基因成功表達”的含義判斷檢測VP40基因是否成功表達的方法。

（1）過程①中選用兩種限制酶切割，可以使目的基因的兩端產生不同的黏性末端，避免目的基因環(huán)化，保證目的基因按一定方向插入到質粒中。

（2）圖中過程②用Ca2+處理大腸桿菌，可以增大細胞壁的通透性，使大腸桿菌易于吸收質粒（外源DNA）（或處于感受態(tài)），提高轉化效率。

（3）基因表達載體中，VP40蛋白基因的首端必須含有啟動子，啟動子是RNA聚合酶結合位點，可以啟動VP40蛋白基因的轉錄。

（4）檢測VP40基因是否成功表達，即檢測VP40基因是否控制合成VP40蛋白，可以用VP40蛋白抗體進行抗原—抗體檢測。VP40蛋白抗體可以特異性的和埃博拉病毒的VP40蛋白結合，使之凝集成團，失去侵染細胞的能力。