Question

【題目】如圖為某質粒表達載體簡圖，小箭頭所指分別為限制酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位點，ampR為青霉素抗性基因，tctR為四環(huán)素抗性基因，P為啟動子，T為終止子，ori為復制原點．又知植物甲具有極強的耐旱性，其耐旱性與某個基因有關．若從該植物中獲得該耐旱基因，并將其轉移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性．已知耐旱基因兩端分別有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在內的多種酶的酶切位點．據(jù)圖回答：

（1）獲得耐旱基因常用基因文庫法．理論上，_________________（填基因文庫種類）中含有該生物的全部基因；而_________________（填基因文庫種類）中含有生物的部分基因．將含有耐旱基因的DNA與該質粒表達載體分別用EcoRⅠ酶切，酶切產(chǎn)物用DNA連接酶處理后，兩兩連接的產(chǎn)物有_________種。

（2）將上述連接產(chǎn)物導入無任何抗藥性的宿主細胞后，將這些宿主細胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能正常生長的宿主細胞所含有的連接產(chǎn)物是___________________________。

（3）目的基因表達時，RNA聚合酶識別和結合的位點是_______________，其合成的產(chǎn)物是_______________。

（4）在上述實驗中，為了防止目的基因和質粒表達載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，酶切時應選用的酶是_______________。

（5）假如用得到的二倍體轉基因耐旱植株自交，子代中耐旱植株與不耐旱植株的數(shù)量比為3：1時，則可推測該耐旱基因整合到了_______________________（填“同染色體的一條上”或“同染色體的兩條上”）。

Answer 1

【答案】 基因組文庫 cDNA文庫 3（或6） 載體-載體連接物（或質粒-質粒連接物） 啟動子 mRNA EcoRⅠ和BamHⅠ 同染色體的一條上

【解析】試題分析：

（1）基因組文庫中含有該生物的全部基因，cDNA文庫中含有生物的部分基因。將含有耐旱基因的DNA與該質粒表達載體分別用EcoRⅠ酶切，酶切產(chǎn)物用DNA連接酶處理后，兩兩連接的產(chǎn)物有：目的基因-載體連接物、質粒-質粒連接物、目的基因-目的基因連接物（或包括這3種連接順序相反的另三種），故是3（或6）種。

（2）能正常生長的宿主細胞所含有的連接產(chǎn)物是載體-載體連接物（或質粒-質粒連接物），保證了tctR——四環(huán)素抗性基因的完整，并能正常表達。

（3）目的基因表達時，RNA聚合酶識別和結合的位點在DNA上，是啟動子，其合成的產(chǎn)物是mRNA。

（4）在上述實驗中，為了防止目的基因和質粒表達載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，酶切時應選用的酶是EcoRⅠ和BamHⅠ。

（5）假如用得到的二倍體轉基因耐旱植株自交，子代中耐旱植株與不耐旱植株的數(shù)量比為3：1時，則可推測該耐旱基因整合到了同染色體的一條上，相當于一對基因的雜合體自交。