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下圖為某種質粒表達載體簡圖，小箭頭所指分別為限制性內切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位點，ampR為青霉素抗性基因。tetR為四環(huán)素抗性基因，P為啟動子，T為終止子，ori為復制原點。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在內的多種酶的酶切位點。據圖回答：
(1)將含有目的基因的DNA與質粒表達載體分別用EcoRⅠ酶切，酶切產物用DNA連接酶進行連接后，其中由兩個DNA片段之間連接形成的產物有________、_______、_______三種。若要從這些連接產物中分離出重組質粒，需要對這些連接產物進行___________。
(2)用上述3種連接產物與無任何抗藥性的原核宿主細胞進行轉化實驗。之后將這些宿主細胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產物是________；若接種到含青霉素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產物有___________。
(3)目的基因表達時，RNA聚合酶識別和結合的位點是，其合成的產物是_____________。
(4)在上述實驗中，為了防止目的基因和質粒表達載體在酶切后產生的末端發(fā)生任意連接，酶切時應選用的酶是________________。
(1)目的基因和載體連接物    載體和載體連接物   目的基因和目的基因連接物    分離、純化(或篩選)
(2)載體和載體連接物    目的基因和載體連接物、載體和載體連接物
(3)啟動子    mRNA
(4)EcoRⅠ和BamHⅠ
練習冊系列答案
相關習題

科目：高中生物 來源： 題型：

下圖為某種質粒表達載體簡圖，小箭頭所指分別為限制性內切酶EcoRI、BamHI的酶切位點，ampR為青霉素抗性基因，tetR為四環(huán)素抗性基因，P為啟動子，T為終止子，ori為復制原點。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、?BamHI在內的多種酶的酶切位點。?

據圖回答：?

（1）將含有目的基因的DNA與質粒表達載體分別用EcoRI?酶切，酶切產物用DNA連接酶進行連接后，其中由兩個DNA片段之間連接形成的產物有                    、                  、              三種。若 要從這些連接產物中分離出重組質粒，需要對這些連接產物進行                。?

（2）用上述3種連接產物與無任何抗藥性的原核宿主細胞進行轉化實驗。之后將這些宿主細胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產物是            ；若接種到含青霉素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產物是            。?

（3）目的基因表達時，RNA聚合酶識別和結合的位點是            ，其合成的產物是            。?

（4）在上述實驗中，為了防止目的基因和質粒表達載體在酶切后產生的末端發(fā)生任意連接，酶切時應選用的酶是           。?

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科目：高中生物 來源：2010～2011學年湖南省安化縣第十二中學高三第二次月考生物試題 題型：綜合題

右下圖為某種質粒表達載體簡圖，小箭頭所指分別為限制性內切酶EcoRI、BamHI的酶切位點，ampR為青霉素抗性基因，tctR為四環(huán)素抗性基因，P為啟動子，T為終止子，ori為復制原點。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內的多種酶的酶切位點。據圖回答下列問題：

⑴將含有目的基因的DNA與質粒表達載體分別用EcoRI酶切，酶切產物用DNA連接酶進行連接后，其中由兩個DNA片段之間連接形成的產物有______種。若要從這些連接產物中分離出重組質粒，需要對這些連接產物進行分離純化。
⑵用上述幾種連接產物與無任何抗藥性的原核宿主細胞進行轉化實驗。之后將這些宿主細胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產物是____________________；
⑶在上述實驗中，為了防止目的基因和質粒表達載體在酶切后產生的末端發(fā)生任意連接，酶切時應選用的酶是                               。
⑷基因工程是一柄“雙刃劍”，一方面可以極大地提高栽培作物的基因潛力，打破了種間的______隔離，從變異的角度看，基因工程的原理是_____________；另一方面也可能給生態(tài)系統(tǒng)和人類帶來安全隱患，舉一例簡要說明：_______________________。

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科目：高中生物 來源：2008年海南高考生物卷 題型：綜合題

下圖為某種質粒表達載體簡圖，小箭頭所指分別為限制性內切酶EcoRI、BamHI的酶切位點，ampR為青霉素抗性基因，tetR為四環(huán)素抗性基因，P為啟動子，T為終止子，ori為復制原點。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、?BamHI在內的多種酶的酶切位點。?

據圖回答：?
（1）將含有目的基因的DNA與質粒表達載體分別用EcoRI?酶切，酶切產物用DNA連接酶進行連接后，其中由兩個DNA片段之間連接形成的產物有               、             、          三種。若 要從這些連接產物中分離出重組質粒，需要對這些連接產物進行            。?
（2）用上述3種連接產物與無任何抗藥性的原核宿主細胞進行轉化實驗。之后將這些宿主細胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產物是         ；若接種到含青霉素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產物是         。?
（3）目的基因表達時，RNA聚合酶識別和結合的位點是         ，其合成的產物是         。?
（4）在上述實驗中，為了防止目的基因和質粒表達載體在酶切后產生的末端發(fā)生任意連接，酶切時應選用的酶是       。?

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科目：高中生物 來源：2010～2011學年湖南省高三第二次月考生物試題 題型：綜合題

右下圖為某種質粒表達載體簡圖，小箭頭所指分別為限制性內切酶EcoRI、BamHI的酶切位點，ampR為青霉素抗性基因，tctR 為四環(huán)素抗性基因，P為啟動子，T為終止子，ori為復制原點。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內的多種酶的酶切位點。據圖回答下列問題：

⑴將含有目的基因的DNA與質粒表達載體分別用EcoRI酶切，酶切產物用DNA連接酶進行連接后，其中由兩個DNA片段之間連接形成的產物有______種。若要從這些連接產物中分離出重組質粒，需要對這些連接產物進行分離純化。

⑵用上述幾種連接產物與無任何抗藥性的原核宿主細胞進行轉化實驗。之后將這些宿主細胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產物是____________________；

⑶在上述實驗中，為了防止目的基因和質粒表達載體在酶切后產生的末端發(fā)生任意連接，酶切時應選用的酶是                                。

⑷基因工程是一柄“雙刃劍”，一方面可以極大地提高栽培作物的基因潛力，打破了種間的______隔離，從變異的角度看，基因工程的原理是_____________；另一方面也可能給生態(tài)系統(tǒng)和人類帶來安全隱患，舉一例簡要說明：_______________________。

 

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