Question

【題目】（1）如圖所示，若用兩種識別切割序列完全不同的限制酶E和F從基因組DNA上切下目的基因，并將之取代質(zhì)粒pZHZ1(3.7kb，1kb=1000對堿基)上相應(yīng)的E—F區(qū)域 (0.2kb)，那么所形成的重組質(zhì)粒pZHZ2___________。

A．既能被E也能被F切開

B．能被E但不能被F切開

C．既不能被E也不能被F切開

D．能被F但不能被E切開

（2）已知在質(zhì)粒pZHZl中，限制酶G切割位點(diǎn)距限制酶E切割位點(diǎn)0．8kb，限制酶H切割位點(diǎn)距限制酶F切割位點(diǎn)O．5kb。若分別用限制酶G和H酶切兩份重組質(zhì)粒pZHZ2樣品，據(jù)表所列酶切結(jié)果判斷目的基因的大小為_______kb；并將目的基因內(nèi)部的限制酶G和H切割位點(diǎn)標(biāo)注在圖中。

（3）若想在山羊的乳汁中收獲上述目的基因的表達(dá)產(chǎn)物，則需將重組質(zhì)粒pZHZ2導(dǎo)入至山羊的______細(xì)胞中。若pZHZ2進(jìn)入細(xì)胞后插入在一條染色體DNA上，那么獲得轉(zhuǎn)基因純合子山羊的方式是__________。

（4）上述目的基因模板鏈中的。TGA序列對應(yīng)一個(gè)密碼子，翻譯時(shí)識別該密碼子的tRNA上相應(yīng)的堿基序列是________。一般而言，一個(gè)核糖體可同時(shí)容納________分子的tRNA。

（5）下列四幅圖中能正確反映目的基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物內(nèi)部結(jié)構(gòu)的是___________。

TSS：轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)，TTS：轉(zhuǎn)錄終止位點(diǎn)，STC：起始密碼子，SPC：終止密碼子

Answer 1

【答案】 A 1.2 受精卵 轉(zhuǎn)基因山羊間相互交配 UGA 2（或3） B

【解析】試題分析：據(jù)圖分析，限制酶具有專一性，只能識別特定的DNA序列，并在特定的位點(diǎn)切割磷酸二酯鍵形成DNA片段，獲取目的基因和質(zhì)粒時(shí)切割位點(diǎn)是E和F，重組質(zhì)粒上含有限制酶E和F的切割位點(diǎn)，所以既能被E也能被F切開。

（1）用限制酶從基因組DNA上切下目的基因，并取代質(zhì)粒pZHZ1（3.7kb，1kb=1000對堿基）上相應(yīng)的E-F區(qū)域（0.2kb），用DNA連接酶連接后形成重組質(zhì)粒，則在重組質(zhì)粒中仍然含有限制酶E和限制酶F的切割位點(diǎn)，形成的重組質(zhì)粒pZHZ2既能被E也能被F切開，故A正確。
（2）根據(jù)題中信息，原來質(zhì)粒長度為3.7kb，切去EF（0.2kb）之后還有3.5kb，插入目的基因后形成重組質(zhì)粒，重組質(zhì)粒的長度為1.6+3.1=1.2+3.5=4.7kb，進(jìn)而可推導(dǎo)出目的基因長度為4.7-3.5=1.2kb。重組質(zhì)粒中G的切割位點(diǎn)距E的切割位點(diǎn)0.8kb，單獨(dú)用限制酶G切割后產(chǎn)生1.6kb和3.1kb兩種片段，說明在重組質(zhì)粒中除了圖中標(biāo)示出來的G酶切位點(diǎn)外，還有一個(gè)G酶切位點(diǎn)；H的酶切位點(diǎn)距F0.5kb，用H單獨(dú)酶切后產(chǎn)生1.2kb和3.5kb兩種片段，說明在重組質(zhì)粒中除了圖中標(biāo)示出來的H酶切位點(diǎn)外，還有一個(gè)H酶切位點(diǎn)；根據(jù)題中信息提示“將目的基因內(nèi)部的限制酶G和H切割位點(diǎn)標(biāo)注在圖中”，可確定在EF之間分別含有一個(gè)G和H的酶切位點(diǎn)，進(jìn)而可斷定G的識別位點(diǎn)，在距E點(diǎn)右側(cè)0.8kb處，H的識別位點(diǎn)在距F左側(cè)0.7kb處，如下圖所示：

（3）將目的基因?qū)�入動物�?xì)胞中，通常以受精卵作為受體細(xì)胞，當(dāng)受精卵發(fā)育成山羊后，在雌性山羊的乳汁中可以提取到目的基因的表達(dá)產(chǎn)物。重組質(zhì)粒插入在一條染色體DNA上，可通過雌雄轉(zhuǎn)基因山羊雜交的方法來獲取轉(zhuǎn)基因純合子山羊。

（4）根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則，目的基因的模板鏈中堿基為TGA，則mRNA中對應(yīng)的密碼子為ACU，tRNA中的反密碼子為UGA。一般而言，一個(gè)核糖體可同時(shí)容納2到3分子的tRNA。
（5）在目的基因的起始端有啟動子，末端有終止子，因此轉(zhuǎn)錄形成的mRNA初始位置為TSS（轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)），在末端位置有TTS（轉(zhuǎn)錄終止位點(diǎn)）；同時(shí)mRNA將作為蛋白質(zhì)合成的直接模板，因此其中含有起始密碼子和終止密碼子控制翻譯過程的進(jìn)行，兩個(gè)密碼子分別位于TSS內(nèi)側(cè)和TTS內(nèi)側(cè)。