Question

(附加題)多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果膠使細胞壁破損。成熟的番茄果實中，PG合成顯著增加，能使果實變紅變軟，但不利于保鮮。利用基因工程減少PG基因的表達，可延長果實保質(zhì)期�？茖W(xué)家將PG基因反向接到Ti質(zhì)粒上，導(dǎo)入番茄細胞中，得到轉(zhuǎn)基因番茄，具體操作流程如圖。據(jù)圖回答下列問題：

(1)若已獲取PG的mRNA，可通過_______獲取PG基因。重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)移到大腸桿菌中的目的是______。
(2)用含目的基因的農(nóng)桿菌感染番茄原生質(zhì)體后，可用含有______的培養(yǎng)基進行篩選，理由是______。之后，還需將其置于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為25%的蔗糖溶液中，觀察細胞________現(xiàn)象來鑒別細胞壁是否再生。
(3)由于導(dǎo)入的目的基因能轉(zhuǎn)錄出反義RNA，且能與_________互補結(jié)合，因此可抑制PG基因的正常表達。若________，則可確定轉(zhuǎn)基因番茄培育成功。
(4)將轉(zhuǎn)入反向鏈接PG基因的番茄細胞培育成完整的植株，需要用_______________技術(shù)；其中，愈傷組織經(jīng)______形成完整植株，此過程除營養(yǎng)物質(zhì)外還必須向培養(yǎng)基中添加____________。

Answer 1

(1)逆轉(zhuǎn)錄法      大量復(fù)制目的基因(或克隆目的基因)
(2)卡那霉素      重組質(zhì)粒中含卡那霉素抗性基因而四環(huán)素抗性基因被破壞       是否發(fā)生質(zhì)壁分離
(3)天然的PG基因轉(zhuǎn)錄的mRNA      番茄果實的保質(zhì)期延長
(4)植物組織培養(yǎng)      再分化(或細胞增殖和分化)       植物激素(生長調(diào)節(jié)劑、生長素和細胞分裂素)