Question

α₁-抗胰蛋白缺乏癥是一種在北美較為常見(jiàn)的單基因遺傳病，患者成年后會(huì)出現(xiàn)肺氣腫及其他疾病，嚴(yán)重者甚至死亡。對(duì)于該致病患者�？刹捎米⑸淙甩�₁-抗胰蛋白酶來(lái)緩解癥狀。

（1）圖1表示獲取人α₁-抗胰蛋白酶基因的兩種方法，請(qǐng)回答下列問(wèn)題： 

①a過(guò)程是在           酶的作用下完成的，該酶的作用特點(diǎn)是           。

②c過(guò)程稱(chēng)為           ，該過(guò)程需要的原料是                      。

③要確定獲得的基因是否是所需的目的基因，可以從分子水平上利用

                  技術(shù)檢測(cè)該基因的堿基序列。

（2）利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將控制該酶合成的基因?qū)�入羊的受精卵，最終培育出能在乳腺細(xì)胞表達(dá)人α1-抗胰蛋白酶的轉(zhuǎn)基因羊，從而更易獲得這種酶，簡(jiǎn)要過(guò)程如圖2。

①獲得目的基因后，常利用           技術(shù)在體外將其大量擴(kuò)增。

②載體上綠色熒光蛋白（GEP）基因的作用是便于           �；�因表達(dá)載體d，除圖中的標(biāo)示部分外，還必須含有           。

③若要使轉(zhuǎn)基因羊的后代均保持其特有的性狀，理論上應(yīng)選用           技術(shù)進(jìn)

行繁殖。

 

Answer 1

【答案】

 (1)①限制性核酸內(nèi)切酶    識(shí)別特定的核苷酸序列（1分），并在特定的切點(diǎn)上切割DNA分子（1分）

 ②逆(或反)轉(zhuǎn)錄    4種脫氧核苷酸

③DNA分子雜交（2分）

(2)①PCR（2分）

 ②篩選含有目的基因的受體細(xì)胞（2分）    啟動(dòng)子、終止子（2分）

 ③體細(xì)胞克�。�2分）

【解析】

試題分析：（1）目的基因的獲取包括直接分離法和人工合成法，人工合成法又包括反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。方法1采用直接分離法獲得目的基因，需要用限制性核酸內(nèi)切酶將目的基因剪切下來(lái)，該酶的作用是能夠識(shí)別雙鏈DNA分子中的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)。方法2采用反轉(zhuǎn)錄法獲取目的基因，b過(guò)程為DNA的轉(zhuǎn)錄，從細(xì)胞中獲得mRNA，在體外通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄以4種游離的脫氧核苷酸為原料來(lái)合成目的基因。要檢測(cè)獲得的基因是否是所需要的基因，分子水平上利用DNA分子雜交技術(shù)。（2）PCR技術(shù)可以在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因。標(biāo)記基因的作用是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)。基因表達(dá)載體必須含有啟動(dòng)子、終止子、目的基因和標(biāo)記基因。要使后代保持與親本相同的性狀，理論上應(yīng)選用動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)進(jìn)行繁殖。

考點(diǎn)：該題主要考查基因工程的相關(guān)知識(shí)。意在考生的識(shí)記及應(yīng)用能力。