Question

【題目】基因工程和植物細(xì)胞工程技術(shù)在科研和生產(chǎn)實(shí)踐中有廣泛應(yīng)用，回答下列問題：

（1）①②過程采用最多的是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，該方法利用了農(nóng)桿菌中____________上的T-DNA，T-DNA的特性是________________________。檢測目的基因是否成功導(dǎo)入受體細(xì)胞可用DNA分子雜交技術(shù)，要用____________作探針。

（2）在植物組織培養(yǎng)技術(shù)中，過程③和過程④分別是____________。這兩個過程需在無菌條件下進(jìn)行，培養(yǎng)基中除加入營養(yǎng)物質(zhì)外，還需添加的植物激素是________________________。

（3）若采用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得新的植物體，細(xì)胞間雜交一般采用____________作為誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞融合，與傳統(tǒng)的有性雜交相比，其優(yōu)勢是________________________。

Answer 1

【答案】Ti質(zhì)粒 可轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞并整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上 放射性同位素標(biāo)記含目的基因的DNA片段 脫分化和再分化 細(xì)胞分裂素和生長素 聚乙二醇（PEG） 能克服不同物種間遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙

【解析】

分析題圖：①是構(gòu)建基因表達(dá)載體的過程，需要限制酶和DNA連接酶；②是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過程；③④是植物組織培養(yǎng)過程，其原理是植物細(xì)胞具有全能性，其中③是脫分化過程，④是再分化過程。

（1）將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞最常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，因?yàn)檗r(nóng)桿菌中Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞并整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上；檢測目的基因是否導(dǎo)人受體細(xì)胞可用DNA分子雜交技術(shù)，即用放射性同位素標(biāo)記含目的基因的DNA片段作探針與受體細(xì)胞的DNA進(jìn)行雜交，若有雜交帶，則目的基因已經(jīng)導(dǎo)入受體細(xì)胞。

（2）根據(jù)圖示過程，在植物組織培養(yǎng)技術(shù)中，過程③和過程④分別是脫分化和再分化過程。這兩個過程需在無菌條件下進(jìn)行，培養(yǎng)基中除加入營養(yǎng)物質(zhì)外，還需添加細(xì)胞分裂素和生長素兩種植物激素。

（3）植物體細(xì)胞雜交技術(shù)中，先要去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，再誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，一般采用聚乙二醇（PEG）作為誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞融合，與傳統(tǒng)的有性雜交相比，植物體細(xì)胞雜交能克服不同物種間遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。