Question

香蕉果實中的淀粉酶可分為α-淀粉酶和β-淀粉酶兩種，其中β-淀粉酶不耐熱，在溫度70℃以上易鈍化，而α-淀粉酶耐熱。測定不同成熟度的香蕉中兩種淀粉酶的活性，對研究香蕉的保鮮具有重要意義。請完成以下的實驗方案。

實驗目的：測定一定成熟度香蕉果實中α-淀粉酶和β-淀粉酶活性

實驗原理：α-淀粉酶和β-淀粉酶都能將淀粉分解為麥芽糖，通過特定方法測定麥芽糖的含量。以5分鐘內(nèi)每克樣品水解產(chǎn)生麥芽糖的毫克數(shù)表示酶活性的大小。

實驗方法

⑴．酶液的制備：稱取香蕉果肉2克（含外殼），加適量水置研缽中研磨成勻漿。將勻漿轉入離心管中，攪拌均勻后離心，將上清液轉入100mL容量瓶，用水定容至刻度，得粗酶液。

⑵．首先將粗酶液分裝到兩支試管，甲試管酶液進行70℃±0.5℃恒溫水浴中準確加熱處理15分鐘后，乙試管酶液置于40℃水浴中。

⑶．取試管三個，編號，按下表加入各液：（在答案卷填寫1、2號實驗組所缺的內(nèi)容）

試劑 組別	1%可溶性淀粉液	酶液
對照組	0 mL	1 mL乙試管酶液
1號實驗組（測α-淀粉酶活性）	2 mL	？
2號實驗組 （測總淀粉酶活性）	2 mL	？

將以上各管試劑混勻后，置40℃水浴準確保溫5分鐘，取出后立即向1、2、3號試管中加入4mL 0.4mol/L NaOH，以終止反應。

⑷．測定各試管麥牙糖含量，計算總淀粉酶活性酶活性、α-淀粉酶活性和β-淀粉酶活性（如α-淀粉酶活性=實驗組1測定值—對照組測定值。其他具體方法略）回答問題：

a作為對照組，另一種做法是加入淀粉液但不加酶液，兩者相比較，現(xiàn)行做法的優(yōu)點是______________________________________。

b實驗所測得β-淀粉酶活性=___________________________________。

Answer 1

⑶1 mL甲試管酶液（實驗組1）  1 mL乙試管酶液（實驗組2）

⑷a 香蕉酶提取液中可能含有還原糖，對實驗結果會造成影響，現(xiàn)行對照實驗能消除由此產(chǎn)生的誤差。

B．２號實驗組測定值—1號實驗組測定值（或=總淀粉酶活性—α-淀粉酶活性）

解析:

該題要測定一定成熟度香蕉果實中α-淀粉酶和β-淀粉酶活性，因此應遵循對照原則、科學性原則和單一變量原則。由題干得知β-淀粉酶不耐熱，在溫度70℃以上易鈍化，而α-淀粉酶耐熱。而實驗原理題干中已經(jīng)有所描述，在具體步驟的設計中要注意：①編號；②注意等量原則；③甲試管酶液進行70℃±0.5℃恒溫水浴處理后β-淀粉酶失活，用甲試管酶液分解淀粉所產(chǎn)生的麥芽糖的毫克數(shù)可衡量α-淀粉酶活性，乙試管酶液置于40℃水浴中后α-淀粉酶和β-淀粉酶的活性均未被破壞，用乙試管酶液分解淀粉所產(chǎn)生的麥芽糖的毫克數(shù)可衡量總淀粉酶的活性，故參照對照組，1號和2號的實驗組應分別加入1 mL甲試管酶液和1 mL乙試管酶液；a作為對照組，另一種做法是加入淀粉液但不加酶液，兩者相比較，加入酶液可排除香蕉酶提取液中可能含有的還原糖這個無關變量對實驗結果的干擾，避免誤差；預測得β-淀粉酶活性，因α-淀粉酶比β-淀粉酶耐熱，很難從粗酶液直接處理掉α-淀粉酶，故只能以２號實驗組的測定值—1號實驗組的測定值來衡量。