Question

【題目】某一質粒載體如圖所示，外源DNA分子插入到Ampr或Tetr中會導致相應的基因失活（Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Tetr表示四環(huán)素抗性基因）。有人將此質粒載體用BamH I酶切后，與用BamHI酶切獲得的目的基因混合，加入DNA連接酶進行連接反應，用得到的混合物直接轉化大腸桿菌。結果大腸桿菌有的未被轉化，有的被轉化。被轉化的大腸桿菌有三種，分別是含有環(huán)狀目的基因、含有質粒載體、含有插入了目的基因的重組質粒的大腸桿菌�；卮鹣铝袉栴}：

（1）質粒載體作為基因工程的工具，應具備的基本條件有： （答出兩點即可）。而作為基因表達載體，除滿足上述基本條件外，還需具有啟動子和終止子。

（2）如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進行篩選，在上述四種大腸桿菌細胞中，未被轉化的和僅含環(huán)狀目的基因的細胞不能區(qū)分的，其原因是 ；并且 和 的細胞也是不能區(qū)分的，其原因是 。在上述篩選的基礎上，若要篩選含有插入了目的基因的重組質粒的大腸桿菌單菌落，還需使用含有 的固體培養(yǎng)基。

（3）基因工程中，某些噬菌體經改造后可以作為載體，其DNA復制所需的原料來自于 。

Answer 1

【答案】（1）能夠自我復制、具有標記基因、具有一個至多個限制酶切割位點（答出兩點即可）

（2）二者均不含氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上都不能生長

含有質粒載體 含有插入了目的基因的重組質粒（或答含有重組質粒）

二者都含氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均能生長 四環(huán)素

（3）受體細胞（或宿主細胞）

【解析】

試題分析：（1）質粒載體作為基因工程的工具，應具備的基本條件有具有標記基因、具有一個或多個限制酶切點、能在受體細胞中復制并穩(wěn)定保存．

（2）由于未被轉化的和僅含有環(huán)狀目的基因的大腸桿菌中不含有氨芐青霉素抗性基因，因此如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進行篩選，未被轉化的和僅含有環(huán)狀目的基因的大腸桿菌均不能存活，因此兩者是不能區(qū)分的；含有質粒的大腸桿菌和 含重組質粒的大腸桿菌的細胞由于均含有氨芐青霉素抗性基因，在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上都能生長，因此兩者也是不能區(qū)分的．在上述篩選的基礎上，若要篩選含有插入了目的基因的重組質粒的大腸桿菌的單菌落，還需使用含有四環(huán)素的固體培養(yǎng)基，即含有重組質粒的大腸桿菌在其中不能生長，而含有普通質粒的大腸桿菌能生長．

（3）噬菌體屬于病毒，病毒沒有細胞結構，其DNA復制所需的原料來自于受體細胞．