Question

【題目】大腸桿菌是寄生于人和動物腸道中的細菌，是一種常用的生物學實驗材料，其代謝產物能與染料伊紅美藍反應，使菌落呈黑色。

（1）下表是某公司研發(fā)的一種培養(yǎng)大腸桿菌菌群的培養(yǎng)基配方。

根據用途劃分，該培養(yǎng)基屬于__________（填“選擇”或“鑒別”）培養(yǎng)基，若要分離能分解尿素的細菌需將培養(yǎng)基中__________換成__________，若要鑒定分解尿素的細菌還需將伊紅·美藍換成__________。

（2）培養(yǎng)大腸桿菌時，常用的接種方法是____________________。

（3）培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前通常需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是。對已使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經過______________________處理后才能丟棄,以防止培養(yǎng)物的擴散。

（4）現有一升水樣，用無菌吸管吸取1 mL水樣至盛有9 mL無菌水的試管中，依次稀釋103稀釋度。各取0.1mL已稀釋103倍的水樣分別接種到三個培養(yǎng)基上培養(yǎng)，記錄的菌落數分別為55、56、57，則每升原水樣中大腸桿菌數為________。

（5）為檢測嚴重污染水體中大腸桿菌數量，將水樣適當稀釋后，取樣涂布在上述平板培養(yǎng)基中，應選擇顏色為_____________的菌落進行計數。該方法是通過統(tǒng)計平板上的菌落數來推測樣品中的活菌數，其原理是____________________________。

Answer 1

【答案】 鑒別 蛋白胨 尿素 酚紅指示劑 平板劃線法和稀釋涂布平板法 將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產生 滅菌 5.6×108 黑色 當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌

【解析】【試題分析】

本題考查的培養(yǎng)、分離計數的相關知識，比較容易作答。需要考生理解所學知識的要點，并把握知識間的內在聯(lián)系，在梳理所學知識的同時結合題意分析作答。第（4）小題需要用到公式：單位樣品中的菌落數=（C÷V）×M，其中C代表某一稀釋度下的平板上生長的平均菌落數，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（mL）M代表稀釋的倍數。據此答題。

（1）伊紅美藍是鑒定大腸桿菌的試劑，因此該培養(yǎng)基從用途上屬于鑒別培養(yǎng)基；若要分離能分解尿素的細菌，則需要保證培養(yǎng)基中以尿素為唯一氮源，即將蛋白胨換成尿素；鑒定分解尿素的細菌，需要使用酚紅指示劑，即需將伊紅·美藍換成酚紅指示劑。

（2）培養(yǎng)微生物常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。

（3）在接種前檢測固體培養(yǎng)基是否被污染，通常采用的檢測方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產生；對已使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經過滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴散。

（4）題中稀釋的倍數是103，三個菌落的平均數=（55+56+57）÷3=56個，圖中則每毫升樣品中菌株數=56÷0.1×103=5.6×105個，所以每升土壤浸出液中的菌株數=5.6×105×103=5.6×108個。

（5）由題意可知，大腸桿菌的代謝產物能與染料伊紅美藍反應，使菌落呈黑色，所以檢測大腸桿菌數量時，在平板培養(yǎng)基中應選擇顏色為黑色的菌落進行計數；通過統(tǒng)計平板上的菌落數來推測樣品中的活菌數的原理是當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌。