Question

【題目】某轉(zhuǎn)基因牛的生產(chǎn)技術(shù)流程如圖。請(qǐng)回答：

（1）利用過程①的方法構(gòu)建的基因文庫是___________（填“基因組文庫”或“部分基因文庫”）。利用PCR技術(shù)大量擴(kuò)增此目的基因的前提是__________，以便合成引物；PCR擴(kuò)增過程需要______催化。

（2）轉(zhuǎn)入生長激素基因的牛可通過乳腺細(xì)胞分泌乳汁來生產(chǎn)人生長激素，過程②中，將目的基因與____________的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起構(gòu)建重組質(zhì)粒，通過_________法導(dǎo)入受精卵中，然后利用胚胎工程的___________（答出2項(xiàng)）技術(shù)手段獲得轉(zhuǎn)基因牛。

（3）該轉(zhuǎn)基因牛進(jìn)入泌乳期后，其分泌的乳汁中并未含有人生長激素，可能的原因是____________________。

Answer 1

【答案】部分基因文庫 要有一段已知目的基因的核苷酸（堿基）序列 熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶） 乳腺蛋白基因 顯微注射 早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植 導(dǎo)入的目的基因未能表達(dá)或目的基因與運(yùn)載體反向連接

【解析】

分析題圖：圖示是生產(chǎn)某種轉(zhuǎn)基因牛的操作流程，涉及到的技術(shù)有基因工程、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等。圖中過程①表示利用反轉(zhuǎn)錄法獲得目的基因（生長激素基因）。過程②表示構(gòu)建基因表達(dá)載體，是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體的組成包括啟動(dòng)子、終止子、目的基因、標(biāo)記基因等。

(1) 過程①表示利用反轉(zhuǎn)錄法獲得目的基因（生長激素基因）。因mRNA只是部分基因轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物，所以利用過程①的方法構(gòu)建的基因文庫只包含了一種生物的一部分基因，是部分基因文庫。利用PCR技術(shù)大量擴(kuò)增目的基因的前提是：要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物。PCR擴(kuò)增過程需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）催化。

(2) 過程②表示構(gòu)建基因表達(dá)載體。轉(zhuǎn)入生長激素基因的牛可通過乳腺細(xì)胞分泌乳汁來生產(chǎn)人生長激素，在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)將目的基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起構(gòu)建重組質(zhì)粒，再通過顯微注射法將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受精卵中，然后利用早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受精卵培育成早期胚胎，進(jìn)而利用胚胎移植技術(shù)等手段獲得轉(zhuǎn)基因牛。

(3) 該轉(zhuǎn)基因牛進(jìn)入泌乳期后，其分泌的乳汁中并未含有人生長激素，可能的原因是：導(dǎo)入的目的基因未能表達(dá)，或者是目的基因與運(yùn)載體反向連接，或者是目的基因未成功導(dǎo)入。