【題目】萌發(fā)的小麥種子中α-淀粉和β-淀粉的含量會顯著增高。α-淀粉酶不耐酸、較耐熱,在pH3.6、0℃下可迅速失活。而β-淀粉酶耐酸、不耐熱,在70℃條件下15min后失活。根據(jù)它們的這種特性,可分別測定一種酶的催化效率。某實驗小組進行了“提取小麥種子中α-淀粉酶并測定α-淀粉酶催化淀粉水解的最適溫度”的相關實驗。

實驗材料:萌發(fā)3天的小麥種子(芽長約1cm)

試劑及儀器:5%的可溶性淀粉溶液、碘液、蒸餾水、石英砂、恒溫水溶鍋等。

實驗步驟

步驟一:制備酶溶液

步驟二:將酶液經(jīng)一定方法處理,取出后冷卻。

步驟三:6支干凈的、體積相同并具刻度的試管依次編號,按下表要求加入試劑,再觀察各試管內(nèi)的顏色變化。(注:“+”表示溶液變藍色,其數(shù)量表示藍色深度:“—”表示溶液不變藍色)

請回答下列問題:

1)選用萌發(fā)的小麥種子提取酶液的主要理由是___________

2)步驟二的處理方法是________________。

3)根據(jù)試管___________中觀察的實驗結果,可推斷α-淀粉酶的最適溫度為_____左右。

4)該實驗中能否選用斐林試劑檢測實驗結果?____________。理由是_____________。

5)若要進一步研究小麥種子中β-淀粉酶的最適溫度,則需獲得β-淀粉酶保持活性而α-淀粉酶失活的酶溶液。則步驟二處理的方法是___________________。

6)步驟三的表格中,若②和③順序顛倒,將_________(填“影響”或“不影響”)實驗結果。

【答案】小麥種子萌發(fā)時形成大量的淀粉酶 70℃水浴中15min 4 60℃ 不能 斐林試劑檢測時需水浴加熱,會改變該實驗中的溫度,影響實驗最終結果 將酶液置于pH3.6、溫度為0℃下的環(huán)境中 影響

【解析】

發(fā)芽的大麥種子中存在著兩種淀粉酶:α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶耐熱不耐酸;β-淀粉酶耐酸不耐熱,在70℃條件下15min后即變性失活。若測定大麥種子中α-淀粉酶催化的最適溫度,因此要根據(jù)β-淀粉酶不耐熱,在70℃、15min后失活的特性排除β-淀粉酶的干擾。

(1)小麥種子含有大量的淀粉,萌發(fā)時形成大量的淀粉酶,所以常選用萌發(fā)的種子提取淀粉酶液。
(2)本實驗是探究α-淀粉酶最適溫度,在實驗前需要滅活β-淀粉酶,根據(jù)“β-淀粉酶耐酸、不耐熱,在70℃條件下15min后失活”,所以應將酶液置于70℃水浴中15min下的環(huán)境中。

(3)根據(jù)實驗結果:60℃的組檢測時淀粉完全分解,而低于或高于60℃的實驗組中均有淀粉剩余,可知60℃時酶的活性較高,由于溫度梯度較大,所以不能確定60℃就是最適溫度,但可推斷α-淀粉酶的最適溫度為60℃左右。

(4)斐林試劑檢測時需水浴加熱,而加熱會改變該實驗中的溫度,影響實驗最終結果。所以該實驗中不能選用斐林試劑檢測實驗結果。

(5)若要進一步探究小麥種子中β-淀粉酶的最適溫度,則需獲得β-淀粉酶保持活性而α-淀粉酶失活的酶溶液。而α-淀粉酶在pH為3.6、溫度為0℃下的環(huán)境中會失去活性。所以步驟二處理的方法是將酶液置于pH為3.6、溫度為0℃下的環(huán)境中。

(6)步驟三的表格中,若②和③順序顛倒,則在達到設定溫度前,酶促反應已經(jīng)發(fā)生,故將影響實驗結果。

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