Question

【題目】為了分離和純化高效分解石油的細(xì)菌，科研人員利用被石油污染過(guò)的土壤進(jìn)行了如圖1所示的實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）步驟③的培養(yǎng)基成分與普通液體培養(yǎng)基相比，最大的區(qū)別是步驟③培養(yǎng)基中以_________為唯一碳源。從功能上講，步驟③中使用的培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。

（2）步驟④中使用的培養(yǎng)基中常常要加入________作為凝固劑；接種時(shí)，若在培養(yǎng)基表面連續(xù)進(jìn)行4次劃線（如圖2），則需要對(duì)接種環(huán)灼燒________次。

（3）為了對(duì)石油分解菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，采用________法，得到了如圖3所示的平板。運(yùn)用這種方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目________（填偏高或偏低）。

（4）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行________處理后才能倒掉。若想要長(zhǎng)期保存優(yōu)質(zhì)菌種，可以采用________的方法。

Answer 1

【答案】石油 選擇 瓊脂 5 稀釋涂布分離 偏低 滅菌 甘油管藏

【解析】

從土壤中分離微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株。篩選菌株的過(guò)程要使用選擇培養(yǎng)基，操作過(guò)程中要注意無(wú)菌操作，常用的固體培養(yǎng)基上接種方法主要有平板劃線法和稀釋涂布平板法。微生物計(jì)數(shù)可用稀釋涂布平板法和血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法。

（1）步驟③的培養(yǎng)基成分是篩選能分解石油的培養(yǎng)基，與普通液體培養(yǎng)基相比，最大的區(qū)別是步驟③培養(yǎng)基中以石油為唯一碳源。從功能上講，步驟③中使用的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，能分解石油的細(xì)菌能夠生長(zhǎng)，其它菌不能生長(zhǎng)。

（2）步驟③中使用的培養(yǎng)基中常常要加入瓊脂作為凝固劑。在每次劃線前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌，因此按照?qǐng)D中劃線順序進(jìn)行4次劃線，整個(gè)劃線過(guò)程中需要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒的次數(shù)為5次。

（3）為了對(duì)石油分解菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，采用稀釋涂布分離法，得到了如圖3所示的平板。由于稀釋難度大，常有菌落的重疊，運(yùn)用這種方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目偏低。

（4）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，為避免二次污染，使用過(guò)的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理后才能倒掉。甘油管冷凍保藏法是利用微生物在甘油中生長(zhǎng)和代謝受到抑制的原理達(dá)到保藏目的，若想要長(zhǎng)期保存優(yōu)質(zhì)菌種，可以采用甘油管藏的方法。