Question

【題目】我國科學(xué)家利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法，將含高賴氨酸蛋白基因sb401的表達(dá)載體導(dǎo)入玉米細(xì)胞，最終培育出“轉(zhuǎn)高賴氨酸蛋白基因sb401玉米”。結(jié)合圖示回答問題：

（1）構(gòu)建基因表達(dá)載體時，為了便于sb401基因與Ti質(zhì)粒連接，應(yīng)怎樣處理含該基因的DNA分子和質(zhì)粒？_____________________________________________。

（2）為了使③過程順利進(jìn)行，常用一定的方法處理農(nóng)桿菌，使其處于_________________，以利于質(zhì)粒的導(dǎo)入。為了培養(yǎng)出能穩(wěn)定遺傳的高賴氨酸轉(zhuǎn)基因玉米，應(yīng)將目的基因插入到農(nóng)桿菌的_________上，便于使目的基因整合到水稻的___________上，通過組織培養(yǎng)得到轉(zhuǎn)基因植株后，再進(jìn)行____________即可得到穩(wěn)定遺傳的高賴氨酸轉(zhuǎn)基因玉米。

（3）⑤為__________過程，除了為其提供適宜的溫度、pH、必需的營養(yǎng)條件、植物激素、無菌條件外，通常還需_________________。

Answer 1

【答案】 分別用相對應(yīng)的同一種限制酶同時切割含該基因的DNA分子和質(zhì)粒 感受態(tài) Ti質(zhì)粒的T-DNA 染色體 連續(xù)自交、篩選 脫分化 適宜的溫度、pH、營養(yǎng)條件、植物激素、無菌條件

【解析】試題分析：分析題圖：圖中①表示目的基因的獲取，②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，③④表示采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞；⑤表示脫分化過程；⑥表示篩選；⑦表示再分化形成完整植株的過程。

（1）構(gòu)建基因表達(dá)載體時，需用同一種限制酶同時切割含該基因的DNA分子和質(zhì)粒，以產(chǎn)生相同的黏性末端，這樣便于sb401基因與Ti質(zhì)粒連接。

（2）過程③將目的基因?qū)�入微生物（農(nóng)桿菌）細(xì)胞常用感受態(tài)轉(zhuǎn)化法，即用鈣離子（或氯化鈣）溶液處理農(nóng)桿菌，使其轉(zhuǎn)化為易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)。農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上有可轉(zhuǎn)移DNA（T-DNA），因此應(yīng)該將目的基因插入該DNA，以便將目的基因整合到水稻的染色體DNA上；將含有目的基因的水稻細(xì)胞通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)，在利用連續(xù)自交、篩選的方法可以獲得穩(wěn)定遺傳的高賴氨酸轉(zhuǎn)基因玉米。

（3）過程⑤為脫分化形成愈傷組織的過程，該過程需要適宜的溫度、pH、營養(yǎng)條件、植物激素、無菌條件等，且需要避光培養(yǎng)。